ГОСТ 32644—2014
q
2.9OL
s
/LD
so
(средняя летальная пероральная доза) - статистически определенная
однократная доза вещества, которая может стать причиной смерти 50 процентов животных при
введении пероральным путем. Значение DL^LD
m
выражается в отношении массы тестируемого
вещества к единице массы подопытного животного (мг/кг).
3 Принцип тестирования
Принцип исследования состоит в том. что, основываясь на поэтапной процедуре с
использованием минимального количества животных на каждом этапе, появляется достаточное
количество информации по острой токсичности исследуемого вещества для того, чтобы эту
информацию классифицировать. Вещество вводится перорально каждой группе подопытных
животных в одной из заданных доз. Вещество тестируется с помощью поэтапной процедуры, с
использованием на каждом этапе трех животных одного пола (обычно самок). Отсутствие или
наличие связанной с веществом смертности животных, дозируемых на одном этапе, будет
определять следующий этап, т.е.:
- нет необходимости в дальнейшем исследовании.
- дозирование трех дополнительных животных такой же дозой.
- дозирование трех дополнительных животных следующим, по возрастающей или по
нисходящей, уровнем дозы.
Детали процедуры исследования описаны в Приложении А. Методика позволит сделать вывод
относительно классификации исследуемого вещества с отнесением его к одному из разрядов
классов токсичности, определяемых фиксированным DLeo/LDH пороговых значений.
Не нужно вводить тестируемые вещества в дозах, про которые известно, что они могут
вызывать явную боль или недомогание из-за своего разъедающего или тяжелого раздражающего
действия. Агонизирующие животные или животные, явно испытывающие боль или демонстрирующие
признаки тяжелого и длительного недомогания, должны быть гуманным образом умерщвлены. Их
следует учитывать в интерпретации результатов тестирования, так же, как и животных, умерших во
время исследования. Критерии для принятия решения об умерщвлении агонизирующих или
испытывающих тяжелые боли животных, а также руководство по распознаванию прогнозируемой или
неминуемой смерти, отдельно рассматриваются в документе Руководства [10].
Метод использует заранее установленные дозы и его результаты позволяют ранжировать и
классифицировать вещество согласно Согласованной на глобальном уровне системе классификации
опасности и маркировки химической продукции, вызывающей острую токсичность [11].
В принципе, метод не предназначен для подсчета точной DL^/LDso. но позволяет определить
заданный интервал воздействия, когда предполагается летальный исход, так как смертность
относительно количества животных остается главным ожидаемым результатом такого исследования.
Исследовательскаялаборатория должнаизучитьвсюимеющуюсяинформациюпо
тестируемому веществу до начала исследования. Такая информация будет включать отличительные
особенности и химическую структуру вещества: его физико-химические свойства: результаты любых in
vitro и in vivo исследований токсичности вещества; токсикологические данные по структурно
родственным веществам; и предполагаемое использование вещества. Эта информация является
необходимой, чтобы убедить все заинтересованные стороны относительно того, что исследование
имеет важное значение для защиты здоровья человека, а также она поможет в выборе наиболее
подходящей начальной дозы.
4 Описание метода
4.1 Животные
4.1.1 Выбор видов животных
Предпочтительным видом грызунов являются крысы, хотя могут использоваться и другие виды
грызунов. Как правило, используются самки. Это объясняется тем. что обзоры литературы по
стандартным исследованиям DLrc/LDjo демонстрируют, что. хотя существует лишь небольшое
различие в восприимчивости между полами, в тех случаях, когда такое различие наблюдается, самки,
как правило, несколько более восприимчивы [12]. Тем не менее, если информация о
токсикологических или токсикокинетических свойствах структурно родственных веществ показывает,
что самцы, возможно, должны быть более восприимчивы, тогда следует использовать их. Если
исследование проводится на самцах, это необходимо должным образом обосновать.
Следует использовать молодых здоровых половозрелых животных лабораторных видов. Самки
не должны быть беременными или рожавшими. Каждое животное к началу его дозирования должно
быть в возрасте от 8 до 12 недель и ее масса тела должна попадать в интервал ♦ 20 % средней
массы ранее дозируемых животных.
2