ГОСТ 32258—2013
если после гидролиза в реакционной массе остался твердый остаток, его отделяют на воронке Бюх
нера, промывая остаток на фильтре 30 см3 горячего этилового спирта. Жидкую фазу реакционной
массы используют для экстракции. В делительную воронку добавляют 30 см3 гексана. Содержимое
воронки встряхивают и оставляют для расслаивания жидкостей. В случае образования эмульсии к
смеси в делительной воронке добавляют 20 см3этилового спирта. После расслаивания нижнюю вод
но-спиртовую фазу сливают в колбу, а гексановый экстракт переливают в другую делительную ворон ку.
Такую обработку реакционной массы проводят еще два раза, используя для экстракции гексан по 30
см3и этиловый спирт для расслаивания эмульсии порциями по 20 см3.
По окончании экстракции объединенный гексановый экстракт промывают в делительной во
ронке дистиллированной водой трижды по 30 см3, переносят экстракт в круглодонную колбу вмести
мостью 100 см3, фильтруя через слой безводного сульфата натрия на воронке с пористым фильтром.
Раствор упаривают на ротационном испарителе до объема 50 см3при температуре водяной бани не
выше 60 °С.
Упаренный экстракт переносят в делительную воронку вместимостью 500 см3, добавляют
50 см3 смеси диметилформамида и дистиллированной воды, взятых в объемном соотношении
9:1. интенсивно встряхивают смесь в течение 1 мин, после расслаивания фаз нижнюю сливают
в плоскодонную колбу вместимостью 250 см3, а из верхнего гексанового слоя снова проводят
экс тракцию 50 см3 смеси диметилформамида и дистиллированной воды. Гексановый слой
отбрасы вают, объединенный в плоскодонной колбе диметилформамидный экстракт переносят
в дели тельную воронку, добавляют 100 см3 дистиллированной воды и проводят экстракцию из
водной фазы гексаном трижды - по 50 см3. Водную фазу отбрасывают, а гексановый экстракт
промывают водой трижды по 30 см3, переносят в плоскодонную колбу, добавляют 10 г
безводного сульфата натрия и выдерживают в течение одного часа. Гексан упаривают на
ротационном испарителе до объема 1,5-2.0 см3, оставшийся растворитель удаляют потоком
воздуха через вакуумный аллонж, соединенный с водоструйным насосом, остаток в колбе
растворяют в 0.5 см" этилового спирта.
В стакан вместимостью 100 см3 помещают (2.5
±
0.2) г сефадекса LH-20, добавляют 20 см3
этилового спирта и оставляют для набухания на 3-4 ч. Затем гель переносят, смывая небольшим ко
личеством спирта, в стеклянную хроматографическую колонку, дают растворителю стечь таким обра
зом. чтобы слой спирта над слоем сорбента оставался не ниже 2 мм. На подготовленную колонку
наносят пипеткой остаток экстракта из колбы, трижды смывая его из колбы этиловым спиртом порци
ями по 0.5 см3. Элюирование из колонки полициклических ароматических углеводородов, в том числе
бенз(а)пирена. проводят 40 см3 этилового спирта, первую фракцию объемом 12 см3 отбрасывают,
собирают вторую фракцию объемом 25 см3. Скорость элюирования растворителя 0.5 см7мии обеспе
чивают. создавая небольшое избыточное давление потоком воздуха или азота через насадку, соеди
ненную с воздуходувкой или газовым баллоном. Газ следует подавать через стеклянную трубку, за
полненную силикагелем.
Колонку с сефадексом LH-20 можно использовать многократно. Для этого, не допуская высы
хания сорбента после фракционирования, колонку промывают 25 см3 этилового спирта и наносят
следующую пробу.
Раствор второй фракции переносят в грушевидную колбу, вместимостью 50 см3, раствори
тель упаривают до объема 0.5-1,0 см3, его остаток удаляют в потоке воздуха или азота.
Полученную фракцию, содержащую бенз(а)пирен, далее анализируют.
Одновременно проводят контрольный опыт, проводя все стадии анализа с использованием
реактивов согласно методике, но без навески продукта.
8.2 Условия хроматографирования
Условия хроматографирования подбираются в зависимости от вида применяемого жидкостно
го хроматографа и хроматографической колонки.
В качестве примера можно привести перечень оборудования и условий для хроматографиро
вания:
жидкостной хроматограф с флуоресцентным детектором;
колонка Supelcosil LC-PAM зернением 5 мкм, длиной 150 мм. диаметром 4.6 мм.
флуориметрический детектор: длина волны возбуждающего света 300 нм. эмиссионный
фильтр - 418 нм;
подвижная фаза: ацетонитрил идистиллированная вода в объемном соотношении 8:2;
5