ГОСТ 32426—2013
4.6 Тестовые и контрольные группы
4.6.1 Данные о предварительной токсичноститестируемого веществадля ряски Lomna могутбыть
полезны в отборе подходящихтестовых концентраций. В финальном тесте поопределению токсичности
должно быть по крайней мере пять экспериментальных концентраций, взятых в геометрической про
грессии. Желательно, чтобы фактор разведения между тестовыми концентрациями не превышал 3.2, но
может быть использован больший фактор, если кривая концентрация-эффект имеет нулевой наклон.
Использование менее пяти концентраций должно быть обосновано. Должно быть по крайней мере три
дублирования для каждой тестовой концентрации.
4.6.2 Выбор диапазона тестовых концентраций (тест для определения диапазона и/или финаль
ный тест определения токсичности) должен учитывать следующее:
- для определения ЕС, тестовые концентрациидолжны быть подтверждены величинами ЕС, необ
ходимого уровня достоверности.
Пример — При оценке ЕСМ самая высокая тестовая концентрация должна быть больше чем вели
чина ECir Если £С Мвыходит за пределы диапазона тестовых концентраций, доверительный интервал
слишком велик, есть риск того, что сделать соответствующую статистическую оценку модели
не представляется возможным;
- если целью является оценка LOEC/NOEC, самая низкая тестовая концентрация должна быть
достаточной для того, чтобы рост не был значительно меньше, чем в контроле. Кроме того, самая высо
кая тестовая концентрация должна быть достаточно высокой для того, чтобы рост был значительно
ниже, чем в контроле. Если дело обстоит иначе, тест должен быть повторен с использованием другого
диапазона концентраций (с учетом того, что самая высокая концентрация не должна превышать макси
мальную растворимость или верхний разрешенный предел концентрации, например 100 мг/л).
4.6.3 Каждый тестдолжен включать контроль, содержащий ту же самую питательную среду, коли
чество пластинок и колоний, условия окружающей среды и процедур тестирования, как и тестовые ем
кости, но без исследуемого вещества. Если дополнительно применяют растворитель или диспергатор,
проводят дополнительный контрольс растворителем или диспергатором в тех же концентрациях, что ив
экспериментальных емкостях. Число повторностей в контроле (и контроль с растворителем, если при
менимо) должно быть по крайней мере равным и в идеале дважды превышать количество емкостей,
используемых для каждой тестовой концентрации.
4.6.4 Если определение NOEC не требуется, концепция эксперимента может быть изменена в сто
рону увеличения количества концентраций и сокращения количества повторностей. Количество повто
рений контроля должно быть не меньше трех.
4.7 Воздействие
4.7.1 Колонии, состоящие из двух—четырех зеленых пластинок, берут из маточной культуры и пе
реносят в тестовые емкости в асептических условиях. Каждая экспериментальная емкость должна со
держать в общей сложности 9—12 пластинок. Число пластинок должно быть одинаковым во всех
экспериментальных емкостях. Опыт, полученный в ходе международныхмежлабораторных испытаний с
этим методом, показал, что использование трех повторов, содержащих изначально по 9—12 пластинок
каждый, достаточно для обнаружения различия приблизительно 4 %—7 % по ингибированию в темпах
роста (10 %—15 %. рассчитанных на урожай) мехеду обработками [7].
4.7.2 Расположение экспериментальных емкостей в инкубаторе должно быть случайным, чтобы
минимизировать влияние пространственных различий в интенсивности света или температуре. Распо
ложение емкостей во время наблюдения (или чаще в случае перемещения емкостей) также следует
проводить в случайном порядке.
4.7.3 Если предварительный тест стабильности исследуемого вещества показывает, что тестовая
концентрация не может быть выдержана (т. е. измеренная концентрация падения ниже 80 % начальной) в
течение эксперимента (семь дней), рекомендуется проводить полустатический эксперимент. В этом
случае культивационная среда в контроле и экспериментальных емкостях должна обновляться мини
мум дважды во время теста (например, на третий и пятый день). Частота замены среды зависит от ста
бильности тестируемого вещества; более высокая частота обновления может потребоваться для
поддержания необходимых концентраций очень нестабильных или летучих веществ. В некоторых
случаях может потребоваться динамический (проточный) эксперимент [8]. [10].
4.7.4 Путь воздействия через лиственные аппликации (разбрызгивание) не описан в настоящем
стандарте, взамен см. [11].
5