ГОСТ 32426—2013
4.8 Условия инкубации
4.8.1 Применяют непрерывноеосвещениефлуоресцентной лампой теплого или холодногобелого
света для обеспечения конечной интенсивности освещения в диапазоне 85—135 nEm-2s-’ сдлиной вол
ны в диапазоне фотосинтеза (400—700 нм) на таком же расстоянии от источника света как зеленые
пластинки Lemna (эквивалент 6500—10000 лк). Отклонения от указанной интенсивности света не дол
жны превышать 115 %. Метод определения и измерения света, особенно тип датчика, влияет на точ
ность измерения. Сферические датчики (которые определяют свет со всех углов выше и ниже уровня
измерения) и косинусоидальныедатчики (которые определяют свет со всех углов выше уровня измере
ния) предпочтительнее однонаправленныхдатчикови дадут более высокую точностьдля многоточечно го
источника света, описанного в настоящем стандарте.
4.8.2 Температура в экспериментальных емкостях должна быть (2412) °С. pH среды в контроле
не должен увеличиться больше чем на 1,5 единицы за время теста. Отклонение более 1.5 единицы не
должно влиять на тест, если соблюдены критерии достоверности. Необходимо быть особенно
внима тельным к изменениям pH в ряде случаев, таких как нестабильные вещества или металлы [8].
4.9 Продолжительность
Тест заканчивается через семь дней после помещения растений в экспериментальные ем
кости.
4.10 Измерения и аналитические определения
4.10.1 В начале теста необходимо подсчитать количество зеленых пластинок в эксперименталь
ных сосудах, не пропуская все отчетливо видимые пластинки. Количество пластинок, кажущихся нор
мальными или ненормальными, должно быть определено в начале теста, по крайней мере один раз
каждые три дня во время периода воздействия (то есть покрайней мередважды во время семидневного
периода), и в конце эксперимента. Следует отмечать изменения в развитии растений (например, в раз
мере зеленых пластинок, признаках некроза, хлороза или сгорбленности, распада колонии или потери
плавучести, в длине и появлении корней). Существенныеособенноститестовой среды (например, нали
чие нерастворенного материала, развитие водорослей в экспериментальных емкостях) также должны
быть отмечены.
4.10.2 В течение теста в дополнение к определениям числа пластинок также измеряют действие
тестируемого вещества на одну или больше следующих переменных:
- общая поверхность пластинок;
- сухой вес;
- живой вес.
4.10.3 Определение общей площади поверхности пластинок имеет преимущество в том. что она
может быть установленадля каждого экспериментального сосуда идля контроля в начале, во время и в
конце теста. Сухой или живой весдолжен быть определен в начале теста отобразца, взятого из исполь
зуемой маточной культуры в начале и в конце теста из каждой экспериментальной и контрольной емкос
тей. Если площадь поверхности не измеряется, сухой вес более предпочтителен живому.
4.10.4 Общая площадь поверхности пластинок, сухой и живой вес могут быть определены следу
ющим образом:
- общая площадь поверхности: общая площадь поверхности всех пластинок может быть опре
делена анализом фотографии. Проекцию тестовой емкости и растений можно снять на видеокамеру
(то есть помещая емкость в световой короб) и получающееся изображение перевести в цифровую
форму. Калибровку осуществляют по известной площади поверхности тестовой емкости, которая по
зволяет определить площадь покрытия листовых пластинок. Необходимо соблюдать осторожность,
стараясь не трогать растения в тестовой емкости. Другими более трудоемкими методами являются
фотографирование тестовой емкости и растений, распечатывание фотографии, вырезание силуэтов
колонии и дальнейший анализ с помощью миллиметровой бумаги. Другие методы также подходят (та кие.
как соотношение коэффициента весов между областью силуэта колоний и общей площадью по
верхности);
-
с у х о й
вес: все колонии собирают в каждом тестовом сосуде и ополаскивают дистиллированной
или деионизированной водой. Растения раскладывают на фильтровальную бумагу для поглощения из
бытка воды и высушивают при температуре 60 °С до постоянного веса. Все фрагменты корней
должны быть включены. Сухой вес должен быть выражен с точностью до 0.1 мг минимум;
- живой вес: все колонии переносят в предварительно взвешенную полистироловую трубку (или
трубку излюбого другого инертного материала) с просверленными маленькими (1-миллиметровыми) от-
6