Приложения С
(рекомендуемое)
ГОСТ 32426—2013
Питательная (культивационная) среда
С.1 Рекомендуются различные среды для выращивания L. minor и L. glbba. Для L. minor можно применять из
мененную модифицированную среду Шведского института стандартизации (SIS), а для L. glbba — среду 20Х—ААР.
Составы обеих сред даны ниже. При приготовлении этих сред используют реактивы или химические вещества ана
литической степени чистоты и деионизированую воду.
С.2 Модифицированная культивационная среда (таблица С.1) для выращивания ряски Шведского института
стандартов (SIS):
- маточные растворы I—V стерилизуют автоклавированием (120 ’С. 15 мин) или мембранной фильтрацией
(размер пор 0.2 мкм);
- маточный раствор VI (и. если необходимо, дополнительный VII) стерилизуют только мембранной фильтра
цией: он не должен быть автоклавирован;
- стерильные маточные растворы хранят в прохладном темном месте. Растворы I—V уничтожают через
шесть месяцев, в то время как раствор VI (и дополнительный VII) имеет срок годности до одного месяца.
Т а б л и ц а С.1 — Виды маточных растворов
Концентрация в
маточном растворе,
г/л
Готовая среда
№
маточного
Всщостю
раствора
Концентрация в
готовой среде. мг/л
ЭлементКонцентрация, мг/л
2
i
NaNO.8.5085
к н р о
41.34 13.4
Na; N32; 14
К; Р 6.0; 2.4
иMgS04 -7Н201575
Mg; S7.4; 9.8
hi
СаСЦ-2Н207.236
Ca.CI9.8; 17.5
IVNa..COj4.020
С2.3
V H
j
BO.
j
1.0 1.0
MnCI2 4Н20 0.20 0.20
Na.,Mo04 2Н200.0100.010
ZnS04•7Н200.0500.050
CuS04 SH20 0.0050 0.0050
Co(NOsb-6H 200.0100.010
В 0.17
Мп 0.056
Мо 0.0040
Zn 0.011
Си 0.0013
Со 0.0020
VI FeCI3 • 6H20 0.17 0.84
Na2-EDTA • 2H20 0.28 1.4
Fe0.17
——
VIIMOPS (буфер)490490
Для приготовления одного литра среды SIS добавляют следующие ингредиенты к 900 мл деионизированной
воды:
-10 мл маточного раствора I;
- 5 мл маточного раствора II;
- 5 мл маточного раствора III;
- 5 мл маточного раствора IV:
-1 мл маточного раствора V;
- 5 мл маточного раствора VI;
-1 мл (необязательно) маточного раствора VII.
П р и м е ч а н и е — Маточный раствор VII (буфер MOPS) может быть необходим для некоторых тестируе
мых веществ (см. 3.2.3):
- pH должен равняться 6.5 ± 0.2 с 0.1 или с 1 М HCI или NaOH и далее объем доводят до 1 л деионизирован
ной водой.
С.З Среда 20Х—ААР
Маточный раствор готовят в стерильной дистиллированной или деоинизированной воде.
Стерильный маточный раствор следует хранить а прохладном темном месте. В этих условиях маточный рас
твор хранят не более шести - восьми недель.
15