ГОСТ 32426—2013
3.2 Информация относительно тестируемого вещества
3.2.1 Должен существовать достаточно чувствительный аналитический метод для определения
количества вещества в тестируемой среде.
3.2.2 Информация о тестируемом веществе включает структурную формулу, чистоту, раствори
мость в воде, стабильность в воде и на свету, рКа, К^. давление паров и способность к биодеградации.
Растворимость в воде идавление паров можно использоватьдля расчета константы Генри, которая по
казывает вероятность существенных потерь тестируемого вещества во время тестирования. Это помо
жет узнать, нужны ли специфические меры для управления такими потерями. Если информация
относительно растворимости истабильности тестируемого вещества сомнительна, рекомендуется про
вести оценку в условиях теста, то есть в культивационной среде, температуре, режиме освещения,
который будет использован в тесте.
3.2.3 Контроль pH среды может быть особенно важен, например, при тестировании металлов или
нестабильных веществ в воде. В этом случае рекомендуется дополнительно к культивационной среде
использовать буфер (см. 4.4). Более подробные пояснения по тестированию веществ с физико-хими
ческими свойствами, затрудняющими исследование, представлены в [8].
3.3 Применимость теста
Результаты теста считают достоверными, если время удвоения количества зеленых пластинок в
контроле составляет меньше 2.5 дня (60 часов), соответствуя приблизительно семикратному увеличе
нию через семь дней и средним удельным темпам роста 0,275 день-1. Использование культивационной
среды иусловия эксперимента, описанные в настоящем стандарте, позволяют достичь этого критерия в
статичном тесте [5]. Этот критерий также достижим при полустатичном и проточном экспериментах.
Расчет времени удвоения приведен в 5.1.
3.4 Референтное вещество
Для проверки процедуры тестирования можно использовать референтные вещества, такие, как
3,5-дихлорфенол. использованный в международном межлабораторном тесте [7].
Желательно проверять референтное вещество по крайней мере два раза в год или. если тестиро
вание выполняют редко, параллельно с определением токсичности тестируемого вещества.
4 Описание метода
4.1 Оборудование
4.1.1 Все оборудование, вступающее в контакт с тестовой средой, должно быть выполнено из
стекла или другого химически инертного материала. Стеклянная посуда, используемая для культивиро
вания итестирования, должна быть стерилизована и очищена от всех химических загрязнений, которые
могли бы попасть в тестовую среду. Тестовые емкости должны бытьдостаточно широкими для зеленой
массы различных колоний в контрольных емкостях, чтобы расти, не накладываясьдруг надруга к концу
теста.
Не имеет значения, если корни касаются оснований тестового сосуда, но минимальная глубина не
должна быть менее 20 мм и минимальный объем не должен быть менее 100 мл для каждого тестового
сосуда. Тип тестовой емкости неважен, если он отвечает этим требованиям. Это могут быть стеклянные
стаканы, кристаллизаторы или чашки Петри соответствующих размеров.
Тестовые емкости должны быть накрыты для минимизации испарения и случайных загрязнений,
не нарушая необходимого воздухообмена. Соответствующие тестовые емкости, и особенно покрытие,
не должны создавать затенения или изменения в спектре освещения.
4.1.2 Культуры и тестовые емкости не следует содержать вместе. Это лучше всего сделать, ис
пользуя отдельные помещения для культивации, инкубаторы. Освещение и температура должны быть
управляемы и поддерживаться на постоянном уровне (см. 5.8.1 и 5.8.2).
4.2 Тестовый организм
4.2.1Организмом, используемым для этого теста, является Lemna gibba (L. gibba) или Lomna
minor (L. minor). Краткие описания видов ряски, которые используют для тестирования токсичности,
даны в приложенииА. Растительный материал может бытьполучен из коллекции культуры, другой лабо
ратории или собран в природе. Если материал собран в природе, растения следует содержать в той же
питательной среде, которую используют для теста, минимум восемь недель до использования.
Участки отбора образцовдля стартовой культуры в природе должны быть свободными от очевид
ных источников загрязнения. Если образцы получены из другой лаборатории или коллекции культуры.
з