rO CT EN 14352-2013
Пипеткойотбирают аликвотуобъединенногоэкстракта объемом
10,0 см3 и помещают ее в колбу вместимостью 100 см3. В колбу добавляют
40 см3фосфатно-хлоридного буферного раствора по 4.16, содержимое колбы
тщательно перемешивают и фильтруют через стекловолоконный фильтр по
5.6. Для дальнейшей очистки на иммуноаффинной колонке отбирают аликво
ту фильтрата объемом 10 см3, эквивалентную 0,4 г пробы
7.3 Очистка экстракта на колонке с иммуноаффинным сорбентом
Из входного отверстия колонки удаляют пробку и соединяют колонку с
резервуаром для элюента по 5.7. Далее из выходного отверстия колонки уда
ляют пробку и присоединяют колонку к вакуумному манифолду по 5.11. В
резервуар колонки пипеткой вносят аликвоту экстракта объемом 10 см3 и
пропускают ее через колонку со скоростью одна - две капли в секунду, элюат
отбрасывают. Далее колонку промывают, пропуская через нее 10,0 см3 фос
фатно-хлоридного буферного раствора по 4.16 со скоростью одна - две капли
в секунду до тех пор, пока колонка не заполнится воздухом, промывной
элюат отбрасывают. Фумонизины элюируют порцией метанола по 4.2 объе
мом 1,5 см3со скоростью не более одной капли в секунду, элюат собирают во
флакон вместимостью 4 см3. Собранный элюат выпаривают досуха с помо
щью устройства по 5.13 в токе азота при температуре не более 60 °С. До про
ведения дериватизации и хроматографического анализа сухой остаток хранят
при температуре около 4 °С.
7.4 Деривативацил
7.4.1 Дериватизация фумонизинов в градуировочных растворах
Дериватизацию проводят непосредственно перед хроматографическим
анализом градуировочных растворов На дно пробирки небольшой вмести
мости помещают 50 мм3градуировочного раствора смеси фумонизинов Bi и
В2 и 50 мм3реактива для дериватизации по 4.19. Содержимое пробирки ин
тенсивно перемешивают в течение 30 с с помощью миксера типа Вортекс по
5.12, после чего полученный раствор анализируют методом ВЭЖХ по 7.5.2.
При этом для всех градуировочных растворов соблюдают равные промежут-
S