ГОСТ Р 55765—2013
7Методы испытания
7.1 Условия выполнения испытаний
7.1.1 Общие требования проведения микробиологического анализа и работы с микроорганизма
ми групп патогенности III—IV — по ГОСТ ISO 7218.
7.1.2 Общие требования к помещениям для проведения исследований — по ГОСТ ISO 7218.
7.1.3 Требования к персоналу — по ГОСТ ISO 7218, ГОСТ ИСО/МЭК17025. [1J.
К проведению испытаний допускаются квалифицированные сотрудники, имеющие опыт работы с
микроорганизмами групп патогенности III—IV. изучившиеметодики микробиологических работ.
7.2 Определение внешнего вида, цвета, наличия посторонней примеси, нарушения целостности
(наличиетрещин)ампул (флаконов) проводятвизуально, одновременно проверяяправильностьмарки
ровки.
7.3 Определение pH проводят в соответствии с [2] или (3] иинструкцией поэксплуатации прибора
(рН-метр).
7.4 Определение стерильности
Определение стерильности проводят в соответствии стребованиями ГОСТ 28085.
7.5 Определение безвредности
Общие требования по определению безвредности — по ГОСТ Р 54063.
7.5.1 Материалы, посуда, реактивы и животные
Иглы инъекционные многократного применения по ГОСТ 25377 или ГОСТ ISO 7864.
Шприцы по ГОСТ 22967 или ГОСТ ISO 7886-1.
Стерилизаторпаровой медицинский поГОСТ 19569.
Флаконы стеклянные.
Пипетки стеклянные градуированные по ГОСТ 29230.
Спирт этиловый ректификованный по ГОСТ 18300.
Кролики старшедвухмесячного возраста массой свыше 2.5 кг. не вакцинированные против гемор
рагической болезни кроликов.
Допускается применятьдругие материалы, посуду и реактивы с техническими характеристиками
не хуже вышеуказанных.
7.5.2 Проведение испытания
Содержимое пяти флаконов(ампул)с вакцинойобъединяют, перемешивают и вводят трем кроли
кам внутримышечно по 3.0 см3. За животными наблюдают в течение 10 сут.
7.5.3 Обработка результатов
Вакцину считают безвредной, если она не вызывает гибели или заболевания кроликов, а также
изменений некротического характера на месте введения в течение срока наблюдения.
7.6 Определение антигенной активности
7.6.1 Аппаратура и материалы
Пипетки стеклянные градуированные по ГОСТ 29230.
Планшетдля иммунологических реакций (с U-образнымдном).
Раствор натрия хлорида изотонический 0.9 %-ный по [4].
Эритроциты человека группы 0 (I), 1%-ная взвесь в 0.9 %-ном растворе натрияхлорида.
Натрия гидроокись по ГОСТ4328.
Автоматические пипетки номинальной вместимостью от0.01 до 1,0 см3.
Допускаетсяприменятьдругуюаппаратуру иматериалыстехническимихарактеристиками нехуже
вышеуказанных.
7.6.2 Проведение определения
Контрольантигенной активности проводят в реакции гемагглютинации (РГА).
Для постановки РГАготовятдвукратные разведения вакцины от 1:2до 1:4096. Сэтой целью во все
лунки планшета одного ряда разливают 0,9 %-ный раствор натрия хлорида по 0.05 см3. В первую лунку
планшета вносят объем вакцины, равный 0.05 см3,трехкратно пипетируют и переносят 0.05 см3во вто
рую лунку и т. д. Из последней лунки удаляют 0,05 см3вакцины и переносят в емкость, содержащую 2 %-
ный раствор натрия гидроокиси или любогодругого дезинфектанта.
После разведения вакцины вовселунки вносятпо0.05 см31%-нойсуспензииэритроцитовчелове
ка. Планшетвстряхивают иоставляютпри комнатнойтемпературе 18 °С—20 ®С.Учет реакции проводят
через 60—90 мин. Контролем эритроцитов на спонтанную гемагглютинацию служат две лунки с эритро
цитами и 0,9 %-ным раствором натрия хлорида (в равных объемах).
6