ГОСТР 55328— 2012
5.2.7.3 Сорбция красителей
Измеряют значение pH раствора, полученного по 5.2.7.1. В случае отклонения измеренного значе
ния от заданного интервала (от 2.5 до 3.5 ед. pH) pH доводят добавлением ледяной уксусной кислоты.
Медицинским шприцем набирают по 20 см3 раствора и соединяют шприц с патроном, подготов
ленным по 5.2.7 2. Пропускают анализируемый раствор через патрон по одной капле со скоростью от 10
до 20 капель в минуту до тех пор. пока уровень окрашенного слоя сорбента не достигнет основания
патрона. Остаток раствора пропускают через второй патрон. Объем пропускаемого через патрон рас
твора должен быть не менее 40 см3. При необходимости используют от 1до 3 патронов, подготовлен ных
по 5.2 7.2. После этого промывают каждый патрон с сорбированным красителем 25 см3 раствора ледяной
уксусной кислоты по од
1
Юй капле со скоростью от 10 до 20 капель в минуту.
Патроны, заполненные Пьюролайтом или Полиамидом, промывают дистиллированной водой.
5.2.7.4 Десорбция красителей из патронов водным аммиаком
Медицинским шприцем набирают 10 см3 водного аммиака и соединяют шприц с патроном по
5.2.7.3. Пропускают водный аммиак через патрон по одной капле со скоростью от 10 до 20 капель в
минуту. При необходимости промывание патрона водным аммиаком повторяют до полного обесцвечи
вания сорбента (оксида алюминия) в патроне.
Десорбцию красителей из патронов, заполненных Пьюролайтом или Полиамидом, проводят ана
логично, используя элюент 5 по 5.2.1.5.
Элюат (раствор водного аммиака или элюента 5 с красителем, извлеченным из патрона) собира
ют в выпарную чашку по 4.16 и выпаривают досуха на водяной бане с температурой от 80 °С до 90 вС.
Сразу после испарения раствора аммиака чашку с сухим остатком (красителем) охлаждают. Краситель
растворяют в чашке, добавляя пипеткой от 0.5 до 1,0 см3водно-спиртового раствора, по 5.2.2.
5.2.8 Подготовка хроматографической каморы
В хроматографическую камеру вносят элюент 1 по 5.2.2.1. в количестве, необходимом для по
гружения хроматографической пластины на глубину не более 0,5 см от нижнего края пластины. Камеру
плотно закрывают и выдерживают в течение 1ч.
5.2.9 Подготовка пластин для ТСХ анализа
На хроматографическую пластину по 4.3 карандашом наносят линию старта на расстоянии 1 см
от края пластины и линию границы элюента на расстоянии 7 см от линии старта (параллельно рискам
на обратной стороне пластины). На линию старта карандашом наносят точки с интервалом не менее 1
см.
5.3 Проведение анализа
5.3.1 Получение хроматографических карт КО
На пластину, подготовленную по 5.2.9, микрошприцем наносят на линию старта в несколько при
емов с промежуточным подсушиванием на воздухе от 0.3 до 1,0 мм3растворов КО. приготовленных по
5.2.4. После нанесения раствора пластину подсушивают в течение от 3 до 4 мин и затем пинцетом по
4.19 помещают в хроматографическую камеру, подготовленную по 5.2.8. под углом примерно 45". Ка
меру плотно закрывают. Элюирование заканчивают при достижении элюентом линии границы элюента
7.0 см от линии старта. По окончании элюирования пластину вынимают пинцетом и подсушивают.
Аналогично получают хроматографические карты с использованием элюентов 2, 3 и 4.
5.3.2 Обработка хроматографических карт
Л
инейкой измеряют расстояние от центра каждого пятна стандартного красителя и линии границы
элюента до линии старта.
Значение R,стандартного красителя вычисляют по формуле
R ,JjL .
И
’э
где 1
к
- расстояние до линии старта от центра пятна красителя, см;
/, - расстояние до линии старта от линии границы элюента. см.
5.3.3 Обнаружение и идентификация красителей
На хроматографическую пластину, подготовленную по 5.2.9. микрошприцем наносят на линию
старта в несколько приемов с промежуточным подсушиванием на воздухе от 0,3 до 1.0 мм3 раство ра
КО (или нескольких КО отдельно), приготовленных по 5.2.4.2, и от 0,5 до 3.0 мм3 анализируемого
7