ГОСТ Р 55483-2013
5 Отбор и подготовка проб
5.1 Отбор проб - по ГОСТ Р 51447. ГОСТ 9792.
5.2 От представительной пробы продукта с заранее определенной массовой долей жира по
ГОСТ 23042 отбирают лабораторную пробу массой не менее 200 г.
Пробу измельчают на микроизмельчителе тканей в течение 0.5 ч при 2000 об/мин и хранят в
холодильнике при температуре от 0 °С до 5 вС до полного завершения испытания в течение суток.
Допускается хранение проб при температуре от минус 20 °С до минус 10 °С в герметичной
упаковке в течение одной недели с даты отбора проб на исследование.
6 Подготовка к выполнению измерений
6.1 Приготовление растворов
6.1.1 Приготовление 15 %-ного раствора ацетилхлорида в метаноле
В колбу или стакан вместимостью 500 см3количественно вносят 50 см3метанола и осторожно
по каплям прибавляют 7,5 см3 ацетилхлорида. Колбу во избежание резкого вскипания смеси охла
ждают под струей холодной проточной воды или путем ее помещения в снег или лед.
Срок хранения раствора в герметично укупоренном сосуде при комнатной температуре - не
более 2 мес.
6.1.2 Приготовление насыщенного раствора гидроксида калия в метаноле
16.0 г гидроксида калия вносят в колбу вместимостью 200 см3и растворяют в небольшом ко
личестве дистиллированной воды (около 10 см3) одновременно охлаждают под струей проточной хо
лодной воды и добавляют 100 см3метанола.
Срок хранения раствора в герметично укупоренном сосуде при комнатной температуре - не
более 2 мес.
6.1.3 Приготовление насыщенного водного раствора хлорида натрия
35.0 г хлорида натрия вносят в колбу вместимостью 100 см3и растворяют в 65 см3 дистилли
рованной воды.
Срок хранения раствора в герметично укупоренном сосуде при комнатной температуре - не
более 2 мес.
6.1.4 Приготовление стандартного раствора смеси метиловых эфиров жирных кислот
0.1 мг стандартного раствора смеси метиловых эфиров или стандартных образцов отдельных
метиловых эфиров С6-С24 жирных кислот растворяют в 1 см3метанола или гексана в стакане вме
стимостью 10 см3и получают раствор концентрации 0.1 мг/см3.
Для целей градуировки допускается разбавлять 1 см3полученного раствора в 10 раз, смеши
вая его с 9 см3гексана, или использовать готовые растворы метиловых эфиров жирных кислот.
Раствор используют свежеприготовленным.
При использовании смеси разных метиловых эфиров С6-С24 жирных кислот целесообразно
для последующей хроматографической идентификации использовать стандартные растворы различ
ной концентрации этих веществ. Например, концентрация первого вещества 0,1 мг/см3. второго ве
щества. дающего на хроматограмме соседний пик. 0.01 мг/см3 и т. д., чередуя концентрации. Опти
мальное значение концентрации для достаточного сигнала регистрации на экране устанавливается
экспериментально для хроматографа конкретного типа. Например, хорошая идентификация пиков
наблюдается при получении выходного сигнала более 10 мВ с общей интенсивностью сигнала в 1000
мВ. Для полной характеристики анализируемой пробы жира используют раствор смеси всех содер
жащихся в пробе стандартов метиловых эфиров жирных кислот.
Допускается хранение смеси метиловых эфиров или отдельных метиловых эфиров С6-С24
жирных кислот в метаноле при температуре минус 20 °С в запаянной стеклянной ампуле в течение 2
мес.
6.2 Проведение экстракции
10 г анализируемой пробы помещают в колбу с притертой пробкой вместимостью 100 см3, за
ливают смесью 10 см3метанола и 10 см3хлороформа и выдерживают при комнатной температуре в
течение 24 ч для полного растворения липидов.
Перемешиванием смеси (например, на микроизмельчителе тканей) можно сократить срок экс
тракции до 1 ч.
При малом количестве пробы (менее 1 г), с содержанием жира не менее 100 мг. допускается
растирание смеси с растворителем в ступке под тягой в течение 10-15 мин. Затем смесь фильтруют
через бумажный фильтр. Из нижнего прозрачного хлороформного слоя отбирают аликвоту обьемом 0.1
- 3.0 см3(объем аликвоты должен содержать около 10 мг жира) и переносят в колбочку или про-
4