ГОСТ 23050—2012
- кроликов массой (2.0 ± 0,1) кг;
- шприцы однократного применения вместимостью 2 -3 см3;
- иглы инъекционные однократного применения.
6.7.2 Проведение испытаний
Готовят последовательно десятикратные разведения вирусеакцины 10’3, 10 4, 10’5, как указано в
6.6.2. Для разведения вакцины используют раствор Хенкса или 0.9 %-ный раствор натрия хлорида с pH
7.0 - 7.2.
Пользуясь одним шприцом вакцину вводят кроликам массой (2.0 ± 0.1) кг внутримышечно в об
ласть наружной стороны бедра от большего разведения к меньшему;
четырем кроликам - по 1 см3в разведении 10 s; четырем
кроликам - по 1 см3в разведении 10 4; четырем кроликам
- по 1 см3в разведении 10’3. Наблюдение за кроликами
ведут в течение десяти суток.
Титр инфекционности вакцины для кроликов определяют по методу Рида и Менча. Количестводоз
определяется в зависимости от титра инфекционности для кроликов:
Ю30 - в ампуле - 25 доз.
Ю4,0- в ампуле - 50 доз;
Ю5-0 - в ампуле - 250 доз;
6.7.3 Учет результатов
Активность вакцины по титру инфекционности для кроликов должна быть не менее Ю30ЛД5а,си3.
6.8 Определенно безвредности вакцины
Общие требования по определению безвредности - по нормативному документу, действующему
на территории государства, принявшего стандарт.
6.8.1 Оборудование и реактивы
Для проведения испытания используют;
- пипетки градуированные по ГОСТ 29230;
- раствор Хенкса (рабочий) или 0.9 %-ный раствор натрия хлорида (физиологический раствор PH
7.0 - 7,2);
- пробирки по ГОСТ 25336;
- шприцы однократного применения вместимостью 2 -3 см3;
- иглы инъекционные однократного применения;
- овец в возрасте от одного года до пяти лет.
6.8.2 Проведение испытания
Безвредность каждой серии вакцины проверяют на двух овцах не ниже средней упитанности в
возрасте от одного года до пяти лет.
Вакцину разводят исходя из содержания вируса в ампуле (флаконе) стерильным раствором Хенк
са или 0.9 %-ным раствором натрия хлорида, в зависимости от ее активности по титру инфекционности
для кроликов. Вакцину с титром инфекционности для кроликов 103 ЛД50|,СМ3 разводят в соотношении
1 : 25 (25 доз), с титром 104ЛД5011<.Ы3- в соотношении 1 : 50 (50 доз). Вирусвакцину с титром 105 ЛД
5
0, см3
разводят в соотношении 1 : 250 (250 доз). Для получения разведения 1 : 25 ампулу, содержащую до
лиофилизации 2 см3вакцины (1см3вируса), ресуспензируют в 25 см3физиологического раствора, а
флакон, содержащий до лиофилизации 4 см3вакцины (2 см3вируса), ресуспензируют соответственно
в 50 см3физиологического раствора.
Для получения разведения 1 ; 50 ампулу, содержащую до лиофилизации 2 см3 вакцины (1см3
вируса), ресуспензируют соответственно в 50 см3физиологического раствора, а флакон, содержащий
до лиофилизации 4 см3вакцины (2 см3вируса), ресуспензируют соответственно в 100 см3физиологи
ческого раствора.
Для получения разведения 1: 250 ампулу, содержащую до лиофилизации 2 см3вакцины (1см3ви
руса). ресуспензируют соответственно 250 см3физиологического раствора, а во флакон, содержащий
до лиофилизации 4 см3 вакцины (2см3 вируса), добавляют соответственно 500 см3физиологического
раствора.
Для определения безвредности разведение вакцины приготовленное в соответствии с ее актив
ностью по титру инфекционности для кроликов, вводят овцам подкожно в область внутренней стороны
бедра в дозе 2 см3
За иммунизированными овцами ведут наблюдение в течение 20 сут.
7