ГОСТ 31927—2012
Раствор натрия хлорида изотонический 0.9 %-ный стерильный с pH от 7.2 до 7.4 в соответствии с
Фармакопеей, действующей на территории государства, принявшего стандарт, или вода дистиллиро
ванная по ГОСТ6709.
7.5.2 Проведение испытания
Для испытания применяют пять ампул (флаконов) с вакциной. Вакцину в каждой ампуле (флаконе)
регидратируютв 4—5 см3стерильногоизотонического0.9 %-ного раствора натрияхлоридаипроизводят
посев по0.1 см3взвеси вакцины на МПА. МПБ, МППБ под вазелиновым маслом и агар Сабуро в три про
бирки с каждой средой. Засевают в три-четыре чашки с МПА поДригальскому исредой Эндо. Посевы в
пробирках выдерживают в течение 10 сут при температуре 37 °С—38 °С. посевы на чашках — 1сут. на
среде Сабуро при температуре 20 °С—22 °С — до 10сут.
7.5.3 Учет результатов
На питательных средахдолжен быть типичный рост вакцинного штамма — на МПА исреде Эндо
через24чдолжны вырастибесцветные, прозрачные, гладкие, круглыеколониив S-форме, на МПБчерез
16—18 чдолжно быть равномерное помутнение. При этом вакцина не должна содержать посторонних
микробов игрибов.
7.6 Определение количества живых сальмонелл
X
7.6.1 Для определения количества живых сальмонелл применяют аппаратуру, посуду иматериа
лы. указанные в 4.5.1. за исключением вазелинового масла и термостата с температурой нагрева
20 °С—24 °С.
7.6.2 Для определения количества живых клеток в 1см3 вакцины содержимое трехампул (флако
нов) с сухой вакциной разводят стерильным 0.9 %-ным изотоническим раствором натрия хлорида по
7.2.1 до первоначального объема. Путем десятикратных разведений готовят конечную концентрацию
1000 микробных клеток в 1см3, из этого разведения засевают по 0.1 см3(100 микробных клеток) в три
чашки Петри с мясо-пептонным агаром. Для приготовления каждого разведения используютотдельную
стерильную пипетку. Приготовление разведений одной пипеткой недопускается.
Чашки перед засевом подсушивают в термостате 30—40 мин. Посевы инкубируют при температу
ре 37 °С—38 °Свтечение24—36ч. послечего подсчитываютколичествовыросшихколонийи определя
ютконцентрацию (число)живыхбактерий в 1см3вакцины по формуле
Р
/V Ю(1)
X -
~
—
2
ii_ .юю8,
<
где
Р
— количество колоний во всех чашкахиз разведения 10“а;
q — число чашекс разведением 10’в:
Р, — количество колоний во всех чашках из разведения 10 9;
7
, — число чашекс разведением 10*®;
10 — перерасчет количестваживых бактерий на 1см3;
10е — степень разведения вакцины.
Для определенияконцентрацииживыхсальмонелл ввакцинеподсчитываютвыросшиеколониина
МПА в чашках по каждому разведению, полученные показатели суммируют и делят на число чашек,
определяясреднееколичествоживых бактерийдлякаждого разведения, содержащихсяв0,1 см3.Затем
средние показателипокаждомуразведению суммируютиделятначислоиспытуемых разведений (два),
полученное число умножают на степень разведения (10е) и полученный показатель увеличивают в 10
раз. определяя количество живых сальмонелл в 1 см3вакцины. Чашки с зонами сплошного роста
культуры учету не подлежат.
7.6.3 После определения количества живых сальмонелл рассчитывают количество доз в 1 см3
вакцины, котороеустанавливаютпутемделения количестваживыхсальмонелл в 1 см3вакцины на коли
чествоживых сальмонелл (млрд), составляющих одну иммунизирующуюдозу, дляданной вакцины.
Одна иммунизирующаядоза содержитживых микробных клеток.
-1 млрд — для вакцины против сальмонеллеза телятиз аттенуированного штамма Сальмонелла
Дублин №6;
-1 млрд — для вакцины против сальмонеллеза молодняка крупного рогатого скота при паренте
ральном способе введения;
-100 млрд — для вакцины против сальмонеллеза молодняка крупного рогатого скота при перо
ральном способе введения;
- 2 млрд — для сухой живой вакцины против сальмонеллеза водоплавающей птицы;
7