ГОСТ 31959-2012
В.3.3 Кормление
Тест-организмы
Acartia tonsa
Dana питаются двумя видами одноклеточных водорослей, выращиваемых в
лабораторных условиях.
Isochrysis galbana и Rhodomonas reticulata.
Эти водоросли выращивают с использова
нием асептической технологии, чтобы исключить заражение культуры бактериями, водорослями и простейшими
организмами. Для выращивания водорослей
Isochrysis galbana
и
Rhodomonas reticulata
используют следующие
питательные растворы:
а)Раствор А.
состав которого приведен в таблице В.2.
Раствор А хранят в холодильнике при температуре
около 4 °С
не более года.
Т а б л и ц а В.2
Состав
раствора
Азотнокислый натрий по ГОСТ 4168
(NaN03)
Количество
компонента
100.00 Г
Натрий фосфорнокислый однозамвщенный одноводный
(NaH^PO^ ■Н20)
20.00 г
1.30г
0.36
т
33.60 г
Хлориджелеза 6-водный по ГОСТ 4147
(FeCI3 • 6Н20)
Марганец (П)хлористый 4-водный по ГОСТ 612
(MnCI2 - 4Н20)
Борная кислота по ГОСТ 9656
(Н3В 03)
Соль динатриевая зтилендиамин-М.М.М’.М’-тетрауксусной кислоты
2-водная (трилон Б) по ГОСТ 10652
45.00 г
Раствор В (см таблицу В.4)
1.00 см3
Дистиллированная вода
по ГОСТ 6709
1 дм3
Ь)Раствор В.
состав которого приведен в таблице В.З.
Раствор В хранят в холодильнике при температуре
около 4 °С
не более года.
Таблица В.З
Состав раствора
Витамин В12
Количествокомпонента
0.02 Г
Витамин В, (тиамин)
0.40 т
Дистиллированная вода
по ГОСТ 6709
1ДМ3
с)Раствор С. состав которого
приведен в таблице В.4. используют
для приготовления раствора А.
Раствор
С хранят в холодильнике при температуре около 4°С не более года.
Т а б л и ц а В.4
Состав раствора
Цинк хлористый по ГОСТ 4529
(ZnCI2)
Количество компонента
2.1 Г
Кобальт хлористый 6-водный по ГОСТ 4525 (СоС12 • 6Н20)
2.00 т
Аммоний молибденовокислый 4-водный
(NH4)eMo7Cl24 •4Н20)
0.90 т
Медь (II) сернокислая
5
-водная
(CuS04 ■бН ^)
2.00 т
Дистиллированная вода
по ГОСТ 6709
100 см3
П р и м е ч а н и е - В приготовленный раствор добавляют соляную кислоту молярной концентрации 0.1
моль/дмЗ до тех пор. пока раствор не станет прозрачным.
Питательную среду для выращивания водорослей готовят следующим способом:
Морскую воду фильтруют через сито с ячейкой размером 1.0 мкм и обрабатывают в автоклаве в течение 15
мин при температуре 120 °С.
В колбу, содержащую 1 дм3 отфильтрованной и обработанной в автоклаве морской воды, добавляют 1.0 см3
раствора А и 0.05 см3 раствора В. Питательные вещества (растворы А и В) добавляют в морскую воду через сте
рилизующий фильтр.
Культивирование водорослей проводят встеклянных колбах вместимостью 3 дм3при температуре (20 ± 2) °С
с аэрацией среды. Естественное освещение имитируют, используя лампы дневного света, обеспечивающие осве
щенность от 3000 до 10000 лк. при соблюдении
следующего режима:
16 ч - воздействие света. 8 ч - без воздей
ствия света {в темноте).
Культивирование водорослей проводят следующим способом:
В колбу с питательной средой добавляют 15 см3 суспензии водорослей из маточной культуры и выращивают
водоросли втечениедесяти суток. Через 10 сут, когда плотность клеток обычно достигает максимума (107 клетою’см3-
21