ГОСТ 31959-2012
Искусственную морскую воду хранят в емкости из темного стекла с притертой крышкой (ис
пользуют емкости до 10 дм3) при комнатной температуре не болев года.
4.3.3 Проверка ф изиологической чувствительности тест-организмов
Периодически
(не реже одного раза в месяц), а также непосредственно перед тестировани
ем проб,
тест-организмы
(выклюнувшиеся
науплии) проверяют на физиологическую чувствительность.
Для этого определяют среднюю летальную концентрацию модельного токсиканта (72 ч
ЛК50) для
тест-организмов. как указано ниже.
4.3.3.1 Готовят исходный раствор модельного токсиканта массовой концентрацией 1 г/дм3
следующим способом: в мерную колбу вместимостью 1000 см3вносят 1г двухромовокислого калия,
растворяют в небольшом количестве дистиллированной (двионизироваююй) воды, доводят объем
до метки, перемешивают и маркируют.
Срок хранения исходного раствора модельного токсиканта - не более 7 сут.
4.3.3.2 Готовят анализируемые растворы модельного пюксиканта двухромовокислого калия
массовой концентрацией от 1.0 до 10 мг/дм3 следующим способом: в пять мерных колб вместимо
стью 200 см3 вносят исходный раствор двухромовокислого калия массовой концентрацией 1 г/дм3
(см. 4.3.3.1) соответственно в первую колбу -0 .2 см3, во вторую -0 .5 см3, в третью
-
1.0
с
а
г
3,
в
четвертую -1 .5 см3,
в
пятую -2 .0 см3, доводят содержимое каждой колбы до метки морской водой
(см. 4.2 или 4.3.2) и перемешивают. При этом массовая концентрация двухромовокислого калия в
каждом растворе составляет соответственно 1,0:2.0: 5.0: 7.5 и 10.0 мг/дм3.
Анализируемые растворы двухромовокислого калия каждой концентрации готовят непосред
ственно перед определением физиологической чувствительности тест-организмов.
В качестве контрольной пробы используют морскую воду (см. 4.2 или 4.3.2).
4.3.3.3 Проводят тестирование в течение 72 ч по 4.4 аналогично тестированию анализируе
мых проб. При этом используют не менее трех чашек Петри на каждую концентрацию анализируе
мого раствора (см. 4.3.3.2).
4.3.3.4 На основании полученныхрезультатов определяют по 4.5 значение 72 ч ЛК50 модельно
го пюксиканта (двухромовокислого калия) для науплиев Artemia salina
L.
При этом:
- если значение
72 ч
ЛК50 указанного модельного токсиканта находится в диапазоне 6.5 -
8.0 мг/дм3.
то используемые тест-организмы пригодны для тестирования:
- если значение 72
ч
Л К ^ указанного модельного токсиканта не входит в указанный диапазон, то
проверяют соблюдение правильности процедуры тестирования, условия подготовки тест-организмов к
тестированию и. при необходимости, повторяют тестирование с использованием новых тест-организмов.
выращенных из новой партии яиц (см. приложение В).
П р и м е ч а н и е - Значение 72 ч ЛК50 модельного токсиканта указывают в протоколе испытаний, имея в
виду, что эго значение в установленном диапазоне концентраций характеризует токсичность модельного токсикан
та только для использованных тест-организмов, а также характеризует их физиологическую чувствительность, что
позволяет проводить тестирование с использованием указанных тест-организмов.
4.3.3.5. Если в результате тестирования не удалось получить конкретное значение 72
ч
ЛК50. то
для определения 72
ч
ЛК50 используют пробит-анализ.
Пример приведен в приложении А.
4.3.4 Подготовка проб
Перед тестированием предварительно охлажденные или замороженные пробы доводят до
комнатной температуры (от 19 °С до 24 °С).
4.3.4.1 Подготовка исходных проб природной морской воды и воды эстуариев
Отобранные пробы природной морской воды и воды эстуариев фильтруют через мембранные
фильтры с порами диаметрам 3.5 мкм или через обеззоленные фильтры «белая лента».
П р и м е ч а н и е - Мембранные фильтры перед применением должны быть промыты и лростерилизованы
кипячением в дистиллированной воде не менее 10 мин.
Не допускается для фильтрования использовать фильтр «синяя лента».
П р и м е ч а н и е - Фильтр «синяя пента» задерживает коллоидные вещества, что занижает результаты те
стирования.
6