ГОСТ 31959-2012
-
отмытые яйца от пустых оболочек заливают морской водой (см. В. 1.2) необходимой минерализации
(солености), знамением pH 8.0 - 8.3 и содержанием кислорода не
менее
7 мг02/дм3 и при слабой аэрации вы
держивают до выклева.
Выклев науплиев изяиц происходит
через:
-48 ч при температуре 20
°С:
-24 ч при температуре 25 °С.
В.2.2 Регулирование плотности популяции
Как правило, нет необходимости регулировать плотность популяции тест-организмов при подготовке наупли
ев к тестированию.
Первых выклюнувшихся науплиев тщательно отбирают из стакана пипеткой Пастера, концентрируя
их возле одной из стенок направленным источником света (новорожденные науплии имеют положительный
фототаксис).
Втечение одного часа встакане накапливаются новыенауплии. их также переносят пипеткойв отдель
ный сосуд с морской водой и используют для тестирования.
Предварительную адаптацию науплиев Artemia salina
L.
к воде нужной минерализации (солености) не про
водят. так какрачок эвригалинный и может переносить минерализацию (соленость) в широкомдиапазоне.
Вода для замачивания яицArtemia salina
L.
должна быть тойже минерализации (солености), что и анали
зируемая проба.
В.2.3 Кормление
Науплии Artemia salina
L в
течение 3 - 4 сут после
выклева
из яиц не нуждаются
в
кормлении
в
связи с
эндогенным питанием, поэтому при тестировании их не кормят.
В.З Условия культивирования
Acartia tonsa Dana
В.3.1 Оборудование и процедура культивирования
Базовые культуры
Acartia tonsa
Dana
культивируют
в емкости с обьемом
/юрской
воды (см. 5.2), равным
10 - 12 дм3. Аэрацию обеспечивают централизованно через отверстие возле дна емкости диаметром около
1.5 мм. со скоростью приблизительно один пузырек воздуха в секунду. Это обеспечивает мягкую циркуляцию
мор
ской
воды, помогая поддерживать водоросли, являющиеся пищей, во взвешенном состоянии; при этом
удобно использовать сферические емкости или емкости с плоским дном. Использование нескольких емкостей
позволяет разделять культуры по возрастам.
Морскую воду обновляют, по меньшей мере, один раз в неделю. Использованную
морскую
воду пропускают
через несколько нейлоновых сит с ячейками различного размера, в зависимости от того, организмы какого возрас
та необходимо сохранить или отделить, в порядке, приведенном в таблице В.1.
Т а б л и ц а В.1
Размер ячейки
сита,
мкм
60
100
140
180
Характеристика стадииудерживаемого организма
Удерживает все стадии
Удерживает все стадии, кроме яиц и науплиев в возрасте 2 сут
Удерживает копеподитов и взрослых особей
Удерживает только взрослых особей
Тест-организмы, которые необходимо сохранить для возобновления данной культуры, переносят из сита
в свежую
морскую
воду (см. В.1.2). Невылулившиеся яйца собираются на дне емкости и их удаляют путем от
качивания
морской
воды со дна емкости. Однако их трудно отделить от молодых науплиев. которые могут там
находиться, так как на дне емкости собирается также осадок, включая остатки пищи, который
систематически
удаляют.
Обычно новью культуры возобновляют, используя молодь или взрослых особей, отделяя их во время еже
недельной замены
морской
воды, с применением сит размером ячеек 180 и 60 мкм. Допускается проводить отде
ление молоди с меньшими интервалами времени, что позволяет получить более близкие возрастные группы, в том
случае если, например, особей выращивают для использования при тестировании. Другим способом отделения
взрослых особей от молоди является перенос взрослых особей в специальную клетку, которая позволяет яйцам
падать сквозь ячейки сита в контейнер с водой.
В.3.2 Регулирование плотности популяции
Как правило, нет необходимости регулировать плотность популяции, которая была начата особями в возрас
те менее семи суток, до конца первой недели, когда плотность популяции обычно не превышает 25 - 50 особей
на 1 дм3. Когда копелоды достигают взрослой стадии, плотность, при необходимости, должна быть снижена до 25
особей на 1 дм3. Рекомендуется избавляться от взрослых особей в возрасте 5 - 6 недель.
20