ГОСТ 31878—2012
9.2.2 Инокуляция и инкубация
9.2.2.1 Берут три пробирки для каждой серии разбавлений. Допускается для некоторых кормов
и/или всякий раз. когда требуются результаты более высокойточности, инокуляция большегочисла про
бирок(например, пяти вместотрех). Вэтихслучаях, для вычисления методам наиболее вероятногочис
ла следует обратиться ксоответствующим таблицам вГОСТ ISO 7218.
9.2.2.2 Берут три пробиркис селективно обогащенной питательной средой двойной концентрации
(5.2.1, а)]. Используястерильную пипетку переносятвкаждую изтрехпробирокпо 10см3анализируемой
пробы, если исследуемый корм жидкий, или по 10 см3исходной суспензии вслучае исследованиядругих
кормов.
9.2.2.3 Затем беруттри пробирки с селективно обогащенной питательной средой нормальной кон
центрации (5.2.1. Ь)]. Используя стерильную пипетку, переносят вкаждую из трех пробирок по 1см3ана
лизируемой пробы, если исследуемый корм жидкий, или по 1 см3 исходной суспензии в случае
исследования других кормов.
9.2.2.4 Для каждого из последующих разбавлений продолжают действия согласно описанию в
9.2.2.3. Используют свежую стерильную пипетку для каждого разбавления. Введенную суспензию и
питательную среду тщательно перемешивают.
9.2.2.5 Пробирки с питательной средойдвойной концентрации (Э.2.2.2) выдерживают втермоста
те при температуре 30 °С или 37 °С втечение (24 ♦ 2)ч.
9.2.2.6 Пробирки спитательной средой нормальной концентрации (9.2.2.3 иЭ.2.2.4) выдерживают
втермостате при температуре 30 еС или 37 °С втечение (24 ± 2)ч, или. если наэтой стадии необнаружи
вается ниобразованиепузырьков газа,нипомутнение, затрудняющееучет газообразования, инкубацию
продолжают дополнительно втечение (24 ± 2)ч.
9.2.3 Подтверждение (см. приложениеА. рисунок А.З)
9.2.3.1 Из каждой пробирки, прошедшей инкубацию согласно 9.2.2.5. петлей берут суспензию и
вводят ее в пробирку с подтверждающей питательной средой (5.3). Выдерживают в термостате (6.2),
установленном на температуру 30 °С или 37 °С (по договоренности) в течение (24 ♦.2) ч, или. если на
этой стадии образование пузырьков газа не наблюдается, инкубацию продолжают дополнительно в
течение (24 ±2)ч.
9.2.3.2 Процедуру, описанную в 9.2.3.1, выполняют с пробирками, прошедшими инкубацию
согласно Э.2.2.6 и показывающими образование пузырьков газа или помутнение, затрудняющее учет
газообразования, когда один из этих двух признаков наблюдается впервые, т. е. через (24 ±2) ч или (48
±2)ч.
9.2.4 Интерпретация (см. приложение А. рисунок А.2)
Для каждого разбавления подсчитывают общее количество пробирок, в которых подтверждается
образование пузырьков газа согласно 9.2.3 (положительные пробирки) через (24 ± 2) ч или (48 ♦ 2) ч
(если инкубация продлевалась еще на сутки).
10 Обработка результатов
В соответствии с результатами интерпретации (см. 9.1.4) указывают присутствие или отсутствие
колиформных бактерий ванализируемой пробе корма по ГОСТ ISO 7218.
Вычисляют наиболее вероятное число из количества положительных пробирок на каждой стадии
разбавления по ГОСТ ISO 7218.
11 Сходимость результатов исследования
Установлено, чтоприиспользовании метода наиболее вероятного числа (НВЧ) может иметь место
значительный разброс результатов. Доверительные пределы приведены в ГОСТ ISO 7218.
12 Требования безопасности
Требования безопасности выполнения работ и квалификации оператора — по ГОСТ ISO 7218.
5