ГОСТ 31878—2012
3 Термины и определения
В настоящем стандарте применены термины и определения по ГОСТ 31747.
4 Обнаружение колиформных бактерий и определение количества
методом наиболее вероятного числа (НВЧ)
Сущность метода — по ГОСТ 31747.
4.1 Метод обнаружения колиформных бактерий
4.1.1 Впробирку с селективно обогащенной питательной средой вносят около 1 гкорма, пробирку
помещают втермостатдля инкубирования при температуре 30 °С или 37 °С (по договоренности) втече
ние24 ч или 48 ч.
4.1.2 Пробиркупосле выращиванияпо4.1.1 проверяют наналичиепомутнения и/илиобразования
газа. Затем из пробирки, в которой установлено наличие помутнения и/или образования газа, вносят в
другую пробирку с селективно обогащенной питательной средой около 1 см3 суспензии и
проводят повторное выращивание микроорганизмов при температуре 30 °С или 37 °С (по
договоренности) втече ние24 ч или 48 ч.
4.1.3 Присутствие колиформных бактерий подтверждают в случае, если помутнение и/или обра
зование газа замечено после осмотра пробирки, полученной по4.1.2.
4.2Метод НВЧ — определение количества колиформных бактерий
4.2.1 В три пробирки с селективно обогащенной жидкой питательной средой двойной концентра
ции вводят определенное количество анализируемой пробы, если исходный корм являетсяжидким, или
определенное количество исходной суспензии вслучае испытания других кормов.
4.2.2 В три пробирки с селективно обогащенной жидкой питательной средой нормальной кон
центрации вводят определенное количествоанализируемой пробы, если исходный корм является жид
ким, или определенное количество исходной суспензии в случае испытания других кормов.
Затем, втакихжеусловиях, вдополнительные пробирки с питательной средой нормальной концен
трации вводят десятикратные разведения анализируемой пробы или исходной суспензии.
4.2.3 Пробирки с посевами, содержащие селективно обогащенную питательную среду двойной
концентрации, выращивают при температуре 30 °С или 37 °С (по договоренности) втечение 24 ч. а про
бирки. содержащие селективно обогащенную питательную среду нормальной концентрации, инкубиру
ют 24 ч или 48 ч и после этого пробирки осматривают и отмечают образование пузырьков газа или
помутнение, затрудняющее учет газообразования.
4.2.4 Вряд пробирокс подтверждающей питательной средой вводят суспензию культур из проби
рок с селективно обогащенной питательной средой двойной концентрации исуспензию культур из про
бирок с селективно обогащенной питательной средой нормальной концентрации, в которых было
замечено образование пузырьков газа или помутнение.
4.2.5 Посевы впробирках по4.2.4 выращивают при температуре30 Хили 37 аС втечение 24 чили
48 ч иэти пробирки исследуют на формирование газа.
4.2.6 Наиболее вероятное число колиформных бактерий в 1см3или 1гпробы корма (НВЧ) рассчи
тывают исходя из числа пробирок по4.2.5, показывающих формирование газа. Вэтом случае использу
ют таблицу установления наиболее вероятного числа.
5 Питательные среды и разбавители
5.1 Общие положения
Качество подготовки, изготовления и оценки эффективности питательных сред для выращивания
бактерий — по ГОСТ ISO 7218, ГОСТ ISO 11133-1 и ГОСТ ISO 11133-2.
5.2 Селективно обогащенная питательная среда: LST (Триптоза лаурилсульфата)
5.2.1 Состав приведен втаблице 1.
2