ГОСТ 31486—2012
постоянномперемешивании, добавляют 150.0 см3растворагидроокисинатрияпо4.3.2. При этомокрас
ка раствора меняется от светло-желтойдо ярко-желтой.
Стакан с полученным раствором помещаютв водяную баню стемпературой (47± 1)°С и постепен
но, небольшими порциями добавляют 300 г виннокислого калия-натрия. Перемешивание продолжают
при той же температуре до полного растворения реактива.
Растворохлаждают холодной водой до комнатной температуры, переносят в мерную колбу вмес
тимостью 1дм3идоводят объем до метки дистиллированной водой. Приготовленный реактив должен
иметь ярко-желтое окрашивание (без красного оттенка).
При необходимости (в случае образования осадка) раствор фильтруют через воронку со стеклян
ным фильтром.
Срок хранения раствора в темной бутыли при комнатной температуре — не более 6 мес.
4.3.4 Приготовление раствора субстрата ксилана массовой доли 1%
В коническую колбу вместимостью 100 см3вносят 0.5 гксилана. добавляютот 20до 30см3ацетат
ногобуферногораствора по4.3.1, перемешиваютирастворяютпри нагреваниина водяной банестемпе
ратурой от 60 °С до 70 °С. Затем колбу с раствором охлаждают, доливают буферным раствором до 50 г
(помассе)итщательно перемешивают.
При наличии осадка или опалесценции раствор осветляют центрифугированием при 7000 мин-1в
течение от 10до 15 мин или фильтрованием через фильтр со стекловолокном.
Субстрат готовят вдень проведения анализа.
4.3.5 Приготовление рабочих стандартных растворов ксилозы
4.3.5.1 Приготовление основного стандартного раствора ксилозы молярной (массовой) концент
рации 10 мкмоль/см3(1500 мкг/см3)
В мерную колбу вместимостью 100 см3помещают 150 мг высушенной при температуре 105 °С в
течение 1 ч и охлажденной в эксикаторе ксилозы, взвешенной с точностью до 0.0001 г, растворяют в
небольшом количестве ацетатного буферного раствора по 4.3.1, тщательно перемешивают и доводят
объемдо метки.
4.3.5.2 Приготовление рабочих стандартных растворов ксилозы
Из основногостандартногораствораксилозы по4.3.5.1 готовятсерию разведений всоответствиис
таблицей 1.
Т а б л и ц а 1
Обь::v стандартногораствора с молярной
(массовой) концентрацией ксилозы
10 мкмопь/см3(1500 мкп’см3), см3
Объем буферною
раствора, см3
Концентрация ксилозы в разведении
массовая, мкг/см3молярная, мкмолы’см3
0.59.5750.5
1.09.01501.0
1.58.52251.5
2.08.03002.0
2.57.53752.5
3.07.04503.0
3.57.55253.5
4.06.06004.0
5.05.07505.0
6.04.09006.0
Рабочие стандартные растворы ксилозы готовят вдень построенияградуировочногографика, при
этом берут по три параллельных разведения для приготовления каждой концентрации раствора кси
лозы.
4.3.6 Построение градуировочного графика
В 10 пробирок вместимостью 10 см3вносят по 1,0 см3рабочих стандартных растворов ксилозы с
молярнойконцентрациейотО.5до6,0 мкмоль/см3всоответствиистаблицей 1.добавляютпо 1,0 см3дис
тиллированной воды, 3,0 см3 раствораДНС по4.3.3 и быстро перемешивают.
4