ГОСТ 31486—2012
4.6 Обработка результатов
4.6.1 Молярную концентрацию ксилозы (в мкмоль/см3) в опытных и контрольном растворахопре
деляют по градуировочному графику.
4.6.2 Ферментативную активность ксиланазы КсА, ед/г. в анализируемом образце рассчитывают
поформуле
КсА = (С° ~С> >,<D
Гс
где С0— молярная концентрация ксилозы в анализируемой пробе в соответствии с градуировочным
графиком, мкмоль/см3;
Ct — молярная концентрация ксилозы в контрольной пробе в соответствии с градуировочным гра
фиком. мкмоль/см3;
t — продолжительность гидролиза, мин;
с — массовая концентрация ферментного препарата в 1см3рабочего раствора анализируемого
образца, г/см3, рассчитываютпо формуле
где т — масса навески ферментного препарата, г;
V— объем разведения навески при приготовлении основного раствора, см3;
Р — разведениеосновного раствора ферментного препаратадля приготовления рабочего раство
ра по 4.4.3.
4.6.3Заокончательныйрезультатпринимаютсреднеарифметическоезначение результатовдвух
параллельных определений, округленное до первого десятичного знака (X ± А), ед./r, при доверитель
ной вероятности Р =0.95. где А =0.016Х. Границы погрешностиS= i 7 %.
4.7 Сходимость и воспроизводимость результатов
4.7.1 Результаты измерений, полученные в условиях повторяемости (сходимости), признаются
удовлетворительными, если выполняется условие приемлемости:
\Х ,-Х 2\й г 0.01 X.(3)
гдеX, иХ2 — результаты двух параллельных определений, полученныо в условиях повторяемости при
Р=0.95. ед7г;
X — среднеарифметическоедвух параллельныхопределений, ед./г;
г=5 % — предел повторяемости (сходимости).
4.7.2 Результаты измерений, полученные вусловияхвоспроизводимости, признаются удовлетво
рительными. если выполняется условие приемлемости:
|Х ,-Х 2|£Р 0.01 X.(4)
гдеX, иХ2— результатыдвух определений, выполненных вдвух разных лабораториях, ед./г;
X — среднеарифметическоедвух определений, выполненных в двух разных лабораториях,
вД-/г;
R = 10 % — предел воспроизводимости.
5 Определение ферментативной активности ксиланазы с окрашенным
субстратом
5.1 Характеристика метода
5.1.1 Метод основан на количественном определении степени деградации (гидролиза) специфи
ческого субстрата — окрашенного производного ксилана (аэоксилана) — в результатедействия ксила
назы (эидоксиланазы) при определенных стандартных условиях (температура 40 °С, pH 4.7,
продолжительность гидролиза — 20 мин). Диапазон измерений контролируемого показателя от 500
до 1000ед. КсА.
5.1.2 Вкачествесубстрата используютазоксилан.
5.1.3 Продукты реакции — олигомеры с «пришитым» красителем определяют по увеличению
поглощения при длине волны 490 нм.
5.1.4 Для определения активности ферментного препарата измеряют интенсивность окраски,
освобожденной им изокрашенного субстрата, в сравнении с образцом ксиланазы. имеющим известную
ферментативную активность.
6