ГОСТ 31480—2012
вают иа водяной бане). Объем в колбе доводятдо метки дистиллированной водой и снова перемешива
ют. Срок хранения в герметично закрытой посуде в холодильнике — 2 мес при температуре от 4 °С до 6
вС.
7.2.8.2 Приготовление запасного раствора триптофана массовой концентрации 0.1 мг/см3
5 см3запасного раствора триптофана массовой концентрации 1,0 мг/см3(см. 7.2.8.1) помещают в
мерную колбу вместимостью 50 см3,доводят дистиллированной водой до метки и перемешивают. Срок
хранения в герметично закрытой посуде в холодильнике — 2 мес при температуре от 4 °С до 6 °С.
7.2.8.3 Приготовление градуировочного раствора триптофана массовой концентрации 5 мг/дм3
2.5 см3 запасного раствора триптофана массовой концентрации 0.1 мг/см3(см. 7.2.8.2) помещают
в мерную колбу вместимостью 50 см3,доводятдистиллированной водойдо метки и перемешивают. Срок
хранения в герметично закрытой посуде в холодильнике — 14 сут при температуре от 4 гС до 6 °С.
Для построения градуировочного графика приготовленный раствор анализируют по 7.2.10.
7.2.9 Подготовка капилляра к работе
7.2.9.1 Подготовка нового капилляра к работе — по 6.2.4.1.
7.2.3.2 Ежедневная подготовка капилляра к работе
Если капилляроставляли на ночь заполненным дистиллированной водой, то перед работой его не
обходимо промыть гидроокисью натрия (см. 6.2.1.2) идистиллированной водой по 5 мин и затем раство
ром ведущего электролита в течение времени, предусмотренного методикой для режима «Анализ».
Далее надо проверить состояние капилляра, проанализировав градуировочный раствор триптофана
(см. 7.2.8.3). При этом в первую очередь обращают внимание на воспроизводимость времени выхода, а
затем — на стабильность градуировочной характеристики.
В том случае, если накануне капилляр был оставлен заполненным раствором ведущего электро
лита. его не промывают гидроокисью натрия. Растворы ведущего электролита в рабочих ипромывочных
пробирках заменяют свежими порциями и промывают капилляр только раствором ведущего электроли та.
после чего контролируют стабильность градуировочной характеристики.
7.2.9.3 Хранение капилляра
При ежедневной работе рекомендуется после окончания последнего анализа промыть капилляр
раствором тетраборнокислого натрия молярной концентрации с (Na2B4OrЮН20) = 0.02 моль/дм3
(см. 6.2.2.1) в течение 10—15 мин и оставить на ночь заполненным этим же раствором.
П р и м е ч а н и е — При работе с реальными пробами на электрофореграмме могут наблюдаться дрейф ба
зовой линии, появление ступеней и смещение времен выхода компонентов, что связано с возможным мешающим
влиянием матричных компонентов или примесей. В этом случае рекомендуется по окончании работы промыть ка
пилляр дистиллированной водой в течение 2 мин. раствором соляной кислоты (см. 6.2.1.1)— 10 мин. дистиллиро
ванной водой — 5 мин. гидроокисью натрия (см. 6.2.1.2)— 10 мин. дистиллированной водой — 5 мин. буферным
раствором — 5 мин и оставить на ночь заполненным этим же раствором.
7.2.10 Градуировка системы и контроль стабильности градуировочной характеристики
Градуировку системы капиллярного электрофореза проводят методом одного эталона, анализи
руя не менее трех раз градуировочный раствор триптофана (см. 7.2.8.3).
7.2.10.1 Ввод градуировочных растворов
Предварительно необходимо промыть капилляр свежей порцией рабочего буферного раствора
(см. 7.2.7.1), после чего запустить и перевести в режим ожидания программу «МультиХром».
Рекомендуемые параметры ввода: давление 30 мбар. время ввода 5 с. напряжение 0 кВ.
7.2.10.2 Анализ градуировочных растворов
Рекомендуемые параметры анализа: рабочая длина волны 219 нм. напряжение плюс20 кВ; темпе
ратура 40 еС: время анализа 8 мин.
Уровни жидкости в пробирках с буферным раствором на входе и выходе капилляра должны быть
одинаковыми, поэтому необходимо через 7—10анализов пробирки навходе и выходе заново наполнять
свежими порциями буферного раствора одинакового объема.
7.2.10.3 Построение градуировочной зависимости
Электрофореграммы. полученные по 7.2.10.2. обрабатывают в соответствии с процедурой градуи
ровки. описанной в руководстве пользователя программы обработки данных («МультиХром» или анало
гичной). С помощью программы рассчитывают среднюю величину градуировочного коэффициента и
СКО имеющейся выборки. Градуировку следует считать успешной, если величина СКО не превышает
5%. В противном случае градуировочный раствор анализируютеще несколько раз. дополняя градуиро
вочную таблицу до получения указанной величины СКО. Выбраковку неудовлетворительных градуиро-
Ю