ГОСТ 31480—2012
- треонина — 40:
- цистина — 20;
- аргинина — 40:
- бензойной кислоты — 5.
П р и м е ч а н и я
^ Аргинин введен в состав смеси из-за частичного наложения пиков лизина и аргинина, чтобы нивелировать
влияние несимметричности пиков. Бензойная кислота может служить внутренним стандартом и одновременно ре
перным пиком, облегчающим разметку электрофореграмм.
2 Допускается применение рабочих градуировочных смесей с другими концентрациями АК. при этом массо
вая концентрация бензойной кислоты должна быть 5 мг/дм5.
6.2.4 Подготовка капилляра к работе
6.2.4.1 Подготовка нового капилляра к работе
Подготовку нового капилляра к работе проводят в соответствии с руководством по эксплуатации
системы капиллярного электрофореза.
П р и м е ч а н и е — Необходимо следить за уровнем жидкости а пробирке для слива. Не допускается пере
текание жидкости из пробирки в прибор!
6.2.4.2 Ежедневная подготовка капилляра к работе
Если капилляроставляли на ночь заполненным дистиллированной водой, то перед работой его не
обходимо промыть раствором соляной кислоты в течение 10 мин (см. 6.2.1.1), дистиллированной водой в
течение 3 мин. раствором гидроокиси натрия в течение не менее 10 мин (см. 6.2.1.2). снова дистилли
рованной водой 3 мин и затем рабочим буферным раствором (см. 6.2.2.1) в течение 10 мин в условиях,
предусмотренных таблицей 3 для режима «Анализ». Затем следует проконтролировать состояние ка
пилляра. проанализировав рабочую градуировочную смесь No 2 (см. 6.2.3.6) с использованием
существующей градуировки по 6.2.5.
При этом в первую очередь обращают внимание на воспроизводимость по времени выхода. Если
время выхода определяемых компонентов отличается более чем на 5 %. капилляр промывают рабочим
буферным раствором повторно и снова проверяют стабильность градуировочной характеристики. Если
время выхода совпадает, то проверяют найденные концентрации компонентов по 6.2.5.
В том случае, если накануне в капилляре был оставлен раствор ведущего электролита, его не про
мывают соляной кислотой и гидроокисью натрия. Растворы ведущего электролита в рабочих и промы
вочных пробирках заменяют свежими порциями и промывают капилляр только раствором ведущего
электролита, после чего контролируют стабильность градуировочной характеристики.
6.2.4.3 Хранение капилляра
Порядок хранения капилляра при перерывах в работе зависит от интенсивности использования
прибора
При ежедневной работе рекомендуется после окончания последнего анализа промыть капилляр
раствором тетраборнокислого натрия молярной концентрации с (Na2B40 7• 10Н2О) = 0,02 моль/дм3
(см. 6.2.2.1) в течение 10—15 мин и оставить на ночь заполненным этим же раствором.
При перерывах в работе на 2—7 сут капилляр следует промыть дистиллированной водой и оста
вить заполненным ею же.
При перерывах на срок более недели капилляр необходимо после тщательной промывки дистил
лированной водой высушить и оставить в сухом состоянии. В этом случаедля восстановления работос
пособности капилляра его нужно подготовить к работе как новый капилляр.
6.2.5 Градуировка системы
Градуировку системы капиллярного электрофореза проводят способом одногоэталонадля каждо
го из двух условий проведения анализа в соответствии с процедурой, описанной в 6.3.2.
С этой целью не менее трех раз анализируют рабочую градуировочную смесь No2 в условиях, ре
комендованных при определении метионина, аналогичную процедуру осуществляют в условиях, реко
мендованных при определении остальных трех аминокислот. Полученные электрофореграммы
обрабатываются в соответствии с процедурой градуировки, описанной в руководстве пользователя про
граммы обработкиданных («МультиХром» или аналогичной) и рассчитывают средние величины градуи
ровочных коэффициентов и их среднеквадратичные отклонения (СКО). Градуировку следует считать
успешной, если величины СКО не превышают 5 %. Выбраковку неудовлетворительных градуировочных
точек проводят в том случав, если отклонение площади пика и одновременно времени выхода пика
данного компонента превышает 5 % среднеарифметических значений.
6