ГОСТ 31480—2012
6.2.6 Контроль стабильности градуировочной характеристики
Каждый раз перед началом проведения измерений необходимо после подготовки капилляра проа
нализировать рабочую градуировочную смесь No 2. При этом в рабочем журнале фиксируют время вы
хода определяемых компонентов и их массовые концентрации, рассчитанные по существующей
градуировочной характеристике. Градуировку признают стабильной, если отклонение найденных мас
совых концентраций от заданныхзначений не превышает 5 % для метионина и цистина и 10 % для лизи на
итреонина. В противном случае анализируют рабочую градуировочную смесь N?2 еще два раза. При
повторных отклонениях, превышающих указанные нормативы, градуировку системы проводят заново,
начиная с приготовления нового раствора рабочей градуировочной смеси N9 2.
6.3 Проведение измерений
6.3.1 Проведение гидролиза и получение испытуемого раствора
Навеску исследуемого продукта массой 0.1000 гпомещают в стеклянную виалу или ампулу с пере
тяжкой. добавляют 10 см3 раствора соляной кислоты молярной концентрации с (HCI) = 6 моль/дм3
(см. 6.2.1.4). При гидролизе в стеклянной ампуле ее запаивают в пламени газовой горелки в месте пере
тяжки. Виалу с плотно завинченной крышкой или запаянную ампулу помещают вэксикатор, который ста
вят в сушильный шкаф на 14—16 ч при температуре 110 °С (оставляют на ночь).
По окончании гидролиза виалу или ампулу вынимают из эксикатора и охлаждают до комнатной
температуры. Содержимое слегка перемешивают и фильтруют в коническую колбу со шлифом вмести
мостью 25 см3, отбирают в стеклянную бюксу 1 см3фильтрата и выпаривают досуха в потоке теплого
воздуха вентилятора. Бюксу охлаждают при комнатной температуре, сухой остаток растворяют в 1 см3
дистиллированной воды (испытуемый раствор).
В зависимости от объекта исследования и предполагаемого содержания АК проводят разбавление
испытуемого раствора дистиллированной водой. Рекомендуемые разбавления: для зерновых культур в
два раза (соотношение объемов испытуемого раствора и воды 1:1).для продуктов растительного (жмых,
шрот) и животного происхождения, а также комбикормов в пять раз (соотношение объемов испытуемого
раствора и воды 1:4). Отбор испытуемого раствора и воды производят с помощью микродозаторов или
градуированных пипеток.
Критерием оптимальности разбавления является то. что концентрация АК в разбавленном испыту
емом растворе не должна превышать их значений в рабочей градуировочной смеси N9 2.
0.5 см3полученного раствора помещают в пробирку Элпендорфа, центрифугируют для дегазации
при 6000 об’мин в течение 5 мин (рабочий испытуемый раствор) ииспользуют для электрофоретическо
го анализа.
П р и м е ч а н и е — При возникновении затруднений а разметке ликов АК на электрофореграыме сухой
остаток растворяют в 1см3 раствора бензойной кислоты массовой концентрации 5 мг/дм3. Разбавление испытуемо го
раствора проводят раствором бензойной кислоты массовой концентрации 5 мг/дм3(см. 6.2.3.3).
6.3.2 Анализ рабочего испытуемого раствора
Анализ рабочего испытуемого раствора проводят дважды, для определения лизина, треонина и
цистина — в среде буферного раствора тетраборнокислого натрия (см. 6.2.2.1) при температуре 20 °С.
для определения метионина — в среде буферного раствора тетраборнокислого натрия с добавкой ()-
циклодекстрина (см. 6.2.2.2) при температуре 40 еС. При анализе серии проб рационально проанали
зировать их сначала при одном составе буфера, а затем, поменяв буфер и температуру, проанализиро
вать те же растворы повторно. Рекомендуемые условия анализа приведены в таблице 3.
Т а б л и ц а 3 — Условия проведения анализа методом капиллярного электрофореза
Параметр
Определение лизина, треонина и
цистина
Определение метионина
Длина волны, нм
190—200 нм (конкретное значение устанавливается для каждого при
бора по методике, приведенной в приложении Б)
Ввод пробы
Пневматический (давление 30 мбар. время 15 с)
Режим анализа
Напряжение плюс 20 кВ. время 17 мин (при определении метионина
время анализа можно сократить до 10 мин)
Рабочий буферный раствор
По 6.2.2.1
По 6.2.2 2
Температура. °С
20
40
7