ГОСТ 31662—2012
с — массовая концентрация ферментного препарата в реакционной смеси, г/см3, вычисляют по
формуле
с
т
(
2
)
VP2’
где т — масса навески ферментного препарата, г;
V — объем разведения навески при приготовлении основного раствора по4.3.10.1. см3;
Р — разведение основного раствора ферментного препарата для приготовления рабочего раство
ра по4.3.10.2;
2 — разведение рабочего раствора в реакционнойсмеси.
4.5.3ЦеллюлолитическуюактивностьЦлА. ед/г. при определениисферрицианидом калия вычис
ляют по формуле
где С0— молярнаяконцентрацияглюкозы вопытнойпробевсоответствиисградуировочным графиком.
мкмоль/см3;
Ск— молярная концентрация глюкозы в контрольной пробе в соответствии с градуировочным гра
фиком. мкмоль/см3;
р — коэффициентразведениярабочегораствора препаратапоотношению к контрольному (основ
ному) раствору;
t — продолжительностьгидролиза, ч;
с — массовая концентрация ферментного препарата в реакционной смеси, г/см3, поформуле (2).
4.5.4За окончательныйрезультатпринимают среднеарифметическоезначениерезультатовдвух
параллельныхопределений, округленноедо первогодесятичного знака (X ±
А), ед/г,
при доверительной
вероятности Р =0,95, где 4= 0,01 6 •X. Границы погрешности6= «7 %.
4.6 Сходимость и воспроизводимость результатов
4.6.1 Результаты измерений, полученные в условиях повторяемости (сходимости), признаются
удовлетворительными, если выполняетсяусловие приемлемости;
|Xi - Хг| £ г •0,01 •
X .
(4)
гдеХ, иХ2 — результаты двух параллельныхопределений, полученные в условиях повторяемости при
Р= 0.95, ед/г;
X — среднеарифметическоедвух параллельных определений, ед/г;
г= 5 % — предел повторяемости (сходимости).
4.6.2 Результаты измерений, полученныев условияхвоспроизводимости, признаются удовлетво
рительными. если выполняется условие приемлемости
|Х ,-Х 2|<Я 0.01 X.(5)
гдеХ, иХ2 — результатыдвух определений, выполненных вдвух разных лабораториях, ед/г;
X — среднеарифметическоедвух определений, выполненных вдвух разныхлабораториях,
ед/г;
Я?= 10% — предел воспроизводимости.
5 Метод определения ферментативной активности целлюлазы
с использованием натриевой соли карбоксиметилцеллюлозы
5.1 Характеристика метода
5.1.1 Методоснованнаколичественном определении восстанавливающихсахаров, образующих
ся при действии ферментов целлюлолитического комплекса на натриевую соль карбоксиметилцеллю
лозы (Na-КМЦ).
5.1.2 За единицу целлюлолитической активности (1 ед. КМЦлА) принято количество фермента,
катализирующего гидролиз Na-КМЦдо образования 1мкмоля восстанавливающихсахаров (в пересче
те на глюкозу) за 1мин при температуре 50 еС. значении pH 4.7 ипродолжительности гидролиза 10 мин.
5.1.3 Содержание восстанавливающих сахаров, образующихся в результате ферментативной
реакции, определяют колориметрическим методом с ДНС-реактивом и рассчитывают по градуировоч
ному графику, построенному для глюкозы. Диапазон измерений контролируемого показателя
50-500 ед. КМЦлА.
7