ГОСТ 31662—2012
- водяную баню любого типа, котораяобеспечивает поддержаниетемпературы (100 i 1)С;
■ таймер любого типа с погрешностью ±30с;
- механическую мельницу, обеспечивающую размалывание исследуемого образца ферментного
препарата до полного прохода пробы через сито;
- сито с размером отверстий 1.0 мм, сделанное из металлического проволочного тканого мате
риала.
4.2.2 Для определения ферментативной активности целлюлазы используют следующие лабора
торную посуду и материалы:
- колбы мерные 1{2)-50,100.200.500,1000-2 по ГОСТ 1770;
- воронки ВФ — 1(2}-60-ПОР 500 ТХС по ГОСТ25336:
- пробирки П 1-14-120ХС или П 1-16-150 ХС по ГОСТ 25336;
- пипетки по ГОСТ 29227;
- пипетки автоматические номинальной вместимостью от0.1 до 1.0 см3с наконечниками;
- колбы и стаканы (бюксы) СВ 19/9 и24/10 по ГОСТ25336;
- стаканы В-1-25.50.100,150,250,600.800,1000 ТС по ГОСТ25336;
- цилиндры 1(2,3,4}-50 (100) поГОСТ 1770
- ступку и пестикфарфоровые по ГОСТ 9147.
4.2.3 Для определения ферментативной активности целлюлазы используют следующие
реактивы:
- кислотууксусную ледяную поГОСТ 61;
- натрий уксуснокислый трехводный по ГОСТ 199;
- калий-натрий виннокислыйчетырехводный по ГОСТ 5845;
- калий железосинеродистый по ГОСТ 4206:
- натрия гидроокисьпо ГОСТ4328:
- водудистиллированную поГОСТ 6709;
- кислоту 3.5-динитросалициловую (ДНС) кристаллическую с содержанием основного вещества
98%,
- D-глюкозу по ГОСТ 6038;
- хроматографическую бумагу массой от 98до 102 мг (Watman N41).
4.2.4 Все реактивы должны относиться к подгруппе чистоты 2(х.ч.) или 3(чщ.а.) по ГОСТ 13867.
4.2.5 Допускается применение других средств измерений и вспомогательного оборудования с
метрологическимиитехническимихарактеристиками, а также реактивовпокачествуненижеуказанных.
4.3Подготовка канализу
4.3.1 Для определения ферментативной активности целлюлазы приготавливают ацетатный
буферный раствор молярной концентрации 0.1 моль/дм1с pH 4.7.
4.3.1.1 Ацетатный буферный раствор готовят из растворов уксусной кислоты и уксуснокислого
натрия молярной концентрации0,1 моль/дм1путем их смешивания.
4.3.1.2 Для приготовления раствора уксусной кислоты в мерную колбувместимостью 1 дм3вносят
5.7см3ледянойуксуснойкислоты иразводятвдистиллированнойводеобъемомот200до 300 см3.Затем
доводятобъем растворадистиллированной водой до метки и снова перемешивают.
Срокхранения раствора встеклянной посуде при комнатнойтемпературе — не более 1мес.
4.3.1.3 Для приготовления раствора уксуснокислого натрия в мерную колбу вместимостью 1дм3
вносят 13.6 гуксуснокислого натрия и растворяют вдистиллированной воде объемом от 200до 300 см3.
Затемдоводятобъем растворадо меткидистиллированной водой иперемешивают.
Срокхранения раствора при комнатнойтемпературе — не более 1мес.
4.3.1.4 Для приготовления ацетатного буферного раствора смешивают равные объемы раство
ров уксусной кислоты иуксуснокислого натрия, полученных в соответствии с 4.3.1.2 и 4.3.1.3. измеряют
pH и при необходимостидоводят значение pH до4.7 одним из исходных растворов.
Срокхранения раствора при комнатнойтемпературе — не более 1мес.
4.3.2 Для приготовления раствора натрия гидроокиси массовой доли 10,7 % растворяют 16,05 г
гидроокиси натрия в 150 см3дистиллированной воды. Полученный раствор охлаждают до комнатной
температуры.
4.3.3 Для приготовления реактивадинитросалициловой кислоты (ДНС)массовойдоли 1.0% вста
кан вместимостью 1 дм3 вносят 10.0 г ДНСдобавляют400 см3дистиллированной воды и перемешивают
на магнитной мешалке в течение 25—30 мин при комнатнойтемпературе. Затем постепенно, при посто
янном перемешивании, добавляют 150 см3 раствора гидроокиси натрия по 4.3.2. При этом окраска рас
твора меняетсяот светло-желтойдо ярко-желтой.
з