ГОСТ Р 54374—2011
Типичные колонии колиформных бактерий.
- на VRBL-arape — пурпурно-красные колониидиаметром не менее 0,5 мм, иногда окружены крас
новатой зоной преципитата (осадка) желчи;
- агаре лактозном с бриллиантовым зеленым и феноловым красным — зеленоватые колонии,
окруженные яркой желто-зеленой зоной;
- среде Эндо — красные, розовые, бледно-розовые колонии, часто с металлическим блеском.
Атипичные колонии отличаются от типичных по цвету и размеру колоний.
8.1.2.2 Для дополнительного подтверждения отбирают не менее чем по пять типичных и атипич
ных колоний из чашек Петри с посевами (см. 8.1.2.1).
Атипичные колонии отбирают только те, в которых подтверждено наличие колиформных бактерий
посевом в жидкую подтверждающую среду.
Каждую отобранную колонию пересевают на поверхность скошенного питательного агара (см.
7.4.10, 7.4.11). Посевы инкубируют при температуре (37 ± 1) °С в течение (24 ± 2) ч.
Принадлежность выросших бактерий к колиформным бактериям определяют по отношению к
окраске по Граму, по отсутствию оксидазы и по ферментации лактозы.
8.1.2.3 Окраска по Граму
Из подготовленных культур (см. 8.1.2.2) готовят мазки и окрашивают по Граму по ГОСТ 30425.
Допускается окраску по Граму заменять тестом Грегорсена по ГОСТ Р 52816.
8.1.2.4 Определение отсутствия оксидазы
Определение отсутствия оксидазы проводят по ГОСТ 29184.
Допускается использование дисков промышленного производства для определения оксидазы
(см. 7.4.13).
8.1.2.5 Определение ферментации лактозы
Определение ферментации лактозы проводят по ГОСТ Р 52816.
8.1.2.6 Оценка результатов дополнительного подтверждения принадлежности выявленных бакте
рий к колиформным бактериям
По результатам дополнительного подтверждения к колиформным бактериям относят аэробные и
факультативно-анаэробные не образующие спор грамотрицательные оксидазоотрицательные палочки,
способные ферментировать лактозу с образованием кислоты и газа.
8.2 Определение количества колиформных бактерий
8.2.1 Определение количества колиформных бактерий методом НВЧ — по ГОСТ Р 52816.
Результаты выражают как «НВЧ колиформных бактерий в 1 г (см3) продукта».
8.2.2 Определение количества колиформных бактерий методом посева в/на агаризован-
ные селективно-диагностические среды
8.2.2.1 Подготовка к проведению исследований — по разделу 7.
8.2.2.2 Отбор и подготовка проб — по 7.1.
8.2.2.3 Приготовление разведений — по 7.2.
8.2.2.4 Посев — по ГОСТ Р 52816.
8.2.2.5 Термостатирование — по ГОСТ Р 52816.
8.2.2.6 Подсчет количества колоний по ГОСТ Р 52816.
8.2.2.7 Подтверждение принадлежности выявленных бактерий к колиформным бактериям
Для подтверждения принадлежности выявленных бактерий к колиформным бактериям отбирают
не менее чем по пять типичных и атипичных колоний. Каждую отобранную колонию пересевают в про
бирку с одной из жидких питательных сред (см. 7.4.2—7.4.5). Проведение подтверждения принадлеж
ности выявленных бактерий к колиформным бактериям — по 8.1.1.
Оценка и выражение результатов по проведенному подтверждению — по 8.1.2.
8.2.2.8 Подсчет и выражение результатов
Результаты оценивают по каждой пробе отдельно.
В случае, когда не менее чем в четырех из пяти типичных и атипичных колоний подтвержден рост
колиформныхбактерий (не менее 80 %) считают, что все колонии принадлежат к колиформным бактери
ям. В остальных случаях количество колиформных бактерий определяют исходя из процентного отно
шения подтвержденных колоний к общему количеству колоний, взятых для подтверждения.
Расчет количества колиформных бактерий, определенного посевом а/на агаризованные селектив
но-диагностические среды, на 1 г (см3) продукта проводят по ГОСТ Р ИСО 7218, ГОСТ 26670.
Результаты определения количества колиформных бактерий в пробе продукта выражают и запи
сывают по ГОСТ Р ИСО 7218, ГОСТ 26670.
4