ГОСТ РЕН 14130—2010
6.2 Подготовка пробы
Исследуемую пробу гомогенизируют. Если проба представляет собой продукт твердой консистен
ции. ее измельчают на мельнице подходящей конструкции и снова тщательно перемешивают. Анализ
пробы проводят непосредственно после ее гомогенизации. Подготовку к анализупроб свежих фруктов и
овощей проводят одновременно с экстракцией (см. 6.3.1).
6.3 Приготовление раствора пробы для анализа
6.3.1 Экстракция
Навеску пробы массой, например. 3 г (при содержании витамина С в пробе около 50 мг/100 г), из
меренной с точностью до 1мг, помещают в мерную колбу вместимостью 100 см3,добавляют 80 см3рас
твора метафосфорной кислоты (см. 4.2.8), тщательно перемешивают, после чего объем в колбе
доводят до метки. Содержимое колбы снова перемешивают, после чего фильтруют. Полученный рас
твор представляет собой экстракт из пробы.
При анализесвежихфруктов и овощей от 2до 10 г измельченной ножом пробы помещают в стакан
вместимостью 100 см3, затем вносят некоторое количество раствора метафосфорной кислоты (см.
4.2.8). Содержимое стакана гомогенизируют, количественно переносят в мерную колбу вместимос тью
100 см3,перемешивают ифильтруют. Полученный растворпредставляет собой экстракт из пробы.
П р и м е ч а н и е — Стабильность аскорбиновой кислоты 8 растворе можно повысить, например, путем до
бавления к раствору метафосфорной кислоты 125 см3раствора L-цмстеина (см. 4.2.10). дитиотрейтола или диэтил-
тиаминфосфорной кислоты. При этом следует иметь в виду, что эти стабилизаторы могут влиять на качество
хроматографического разделения. Данная процедура не была использована при проведении межлабораторных ис
пытаний.
6.3.2 Проведение реакции восстановления
Аликвоту отфильтрованного экстракта (см. 6.3.1) объемом 20 см3переносят в стакан вместимос
тью 50 см3, добавляют 10 см3раствора Ц+)-цистеина. Значение pH полученного раствора доводят до
7.0—7.2 при измерении с помощью pH-метра путем добавления по каплям раствора тринатрийфосфата
(см. 4.2.9) при постоянном перемешивании с помощью магнитной мешалки. По достижении указанного
значения pH раствор выдерживают точно 5 мин при постоянном перемешивании. По истечении указан
ного времени значение pH раствора доводятдо2.5—2.8 (по pH-метру) путемдобавления по каплям рас
твора метафосфорной кислоты (см. 4.2.7) при постоянном перемешивании. Полученный раствор
количественно переносят в мерную колбу вместимостью 50 см3, приэтом электроды pH-метра, рабочий
элемент магнитной мешалки и стакан, в котором находился раствор, ополаскивают водой, перенося
смывы в ту же колбу. Объем содержимого в мерной колбе доводят до метки водой, содержимое колбы
перемешивают. Полученный раствор фильтруют через мембранный фильтр (см. 5.5), фильтрат
используют для хроматографического анализа.
При наличии информации о присутствии в анализируемом продукте добавок-загустителей реко
мендуется их удалить из анализируемого раствора перед его хроматографическим анализом во избе
жание порчи хроматографической колонки. Для этого к порции восстановленного раствора пробы
объемом 4 см3добавляют 1см3метанола (см. 4.2.6), полученный раствор перемешивают и фильтруют
через мембранный фильтр (см. 5.5). Фильтрат используют для хроматографического анализа.
6.4 Идентификация
Пик L-аскорбимовой кислоты на хроматограмме раствора пробы идентифицируют по совпадению
ого времени удерживания со временем удерживания пика аналита на хроматограмме градуировочного
раствора, полученной при тех же параметрах хроматографическогоанализа. Идентификацию пика ана
лита можно также проводить путем добавления стандартного раствора в раствор пробы.
Ниже приведены параметры хроматографического анализа, обеспечивающие требуемую степень
хроматографического разделения и пригодные для количественного определения (см. также рису нок
А.1). Данные параметры были использованы при проведении межлабораторных испытаний.
Параметры хроматографической колонки: колонка, заполненная обращенно-фазовым сорбентом
на основе силикагеля с привитыми октадецильными группами и блокированными остаточными силаноль-
ными группами размером частиц сорбента 5 мкм. длина колонки 250 мм. внутренний диаметр 4.0 мм;
подвижная фаза................смесь раствора А и раствора В (4.2.11);
скорость потока подвижной фазы...................................0,7 см3/мин;
ижектируемый объем................................................................30 мм3;
длина волны детектирования................................................... 265 нм.
4