ГОСТ Р 53761—2009
Приложение А
(справочное)
Причины отклонения от стандартного хода анализа
и способы их устранения
Т а б л и ц а А.1
Отклонение
Возможные причины
Способы устранения
1 Полосы по краям геля
расположены выше, чем в
центре
Центральная часть геля на
гревается сильнее краев
Избыточное напряжение
Центральный резервуар заполнить охлаж
дающим раствором
Охлаждающий раствор прокачивать при
температуре (10—15) ’С; уменьшить напря
жение
го красителя
пробы и/или растворов буфе
ров
Диффузия
2 Диффузия лидирующеРаспад раствора белковПриготовить растворы из свежих реакти
вов
Если полосы белка имеют такой же диф
фузный характер, как и полоса лидирующего
красителя, увеличить: силу тока на (25—50) %
3 Вертикальная исчер
панность трека
Избыточная концентрация
белков в пробе
Уменьшить концентрацию белков в пробе;
уменьшить напряжение на 25 %
4 Горизонтальная исчер-
ченность трека
Неполное растворение бел
ков
Полностью растворить пробу;
центрифугировать
5 Широкие или размы
тые полосы или пятна бел
ков
Диффузия в связи с медлен
ной миграцией
Химические модификации
ионными загрязнениями
Неполное обезжиривание
пробы
Увеличить силу тока на 20 %
Деионизовать раствор карбомида
Полностью удалить жир
6 Размывание полос в
латеральном направлении
Диффузия растворовбелков
за пределы лунок до включе
ния напряжения
Уменьшить время между внесением про
бы и подачей напряжения
7 Искривленные полосы
Недостаточная полимери
зация геля вокруг лунок
Наличие солей в пробе
Неровная поверхность геля
Дегазировать раствор мономеров геля;
увеличить концентрации аммония надсер-
нокислого и N. N. N’. N -тетраметилэтиленди-
амина на 25 %
Удалить соли диализом
Проверить стадию взятия проб для приго
товления геля, при необходимости заменить
реактивы
мает более 5 ч
электродного буфера
Низков напряжение
8 Электрофорез заниВысокаяконцентрацияПроверить стадию приготовления электро
дного буфера (при необходимости разбавить
буфер), проверить качество дистиллирован
ной воды, заменить реактивы
Увеличить напряжение на (25—50) %
9 Электрофорез идет
слишком быстро с плохим
разрешением
Буфер слишком разбавлен
Слишком высокое напря
жение
Проверить стадию приготовления электро
дного буфера, проверить качество дистилли
рованной воды, заменить реактивы
Уменьшить напряжение на (25—50) %
9