ГОСТ Р 53162—2008
Т а б л и ц а 2 — Приготовление стандартных растворов
раствор
СтандартныйОбъем, отобранный из
Концентрация афлатоксина, мг/см3
исходного раствора, мкл
В,в >
G,
1
6015.03.75
7.503.75
2
4010.02.50
5.002.50
3
205.001.25
2.501.25
4
102.500.625
1.250.625
П р и м е ч а н и е — Указанные значения приведены в качестве ориентиров. Точные значения массовой
концентрации растворов вычисляют исходя из значений, рассчитанных по формуле (1) — см. 4.12.
4.15 Серная кислота по ГОСТ4204. раствор c(H2SOJ = 2 моль/дм3.
5 Оборудование
Лабораторную стеклянную посуду, которая контактирует с водными растворами афлатоксинов в
серной кислоте(4.15), погружаютв водуна несколькочасов, затемтщательно промывают(например три
раза) водой, чтобы удалить все следы кислоты. Отсутствие кислоты проверяют с помощью индикатор
ной бумаги.
П р и м е ч а н и е — Данная обработка является необходимой, так как использование стеклянной посуды,
промытой не кислотой, может привести к потере афлатоксинов. На практике данная обработка необходима для
круглодонных колб, мерных колб, мерных цилиндров, склянок или пробирок, используемых для градуировочных
растворов и конечных экстрактов (особенно автоматических пипеток), а также пастеровских пипеток, если они ис
пользуются для переноса градуировочных растворов или экстрактов.
Обычное лабораторноеоборудование и. в частности, то. которое приводится ниже.
5.1 Иммуноаффинная(1А) колонка
IA колонка содержитантитела, предназначенныедляафлатоксиновВ,. В2,G, иG2.Колонкадолжна
иметьминимальную емкость не менее 100 нгафлатоксина В, идолжна давать выход не менее80 %для
афлатоксинов В,, В2 и G, и не менее 60 % для афлатоксина G2при внесении в колонку 15см3 градуиро
вочного раствора, содержащего 5 нг каждого афлатоксина в смеси метанол/вода [одна часть метано ла
(4.6) и три-четыре части воды (4.1) по объему]. Колонка должна быть оборудована подходящей
емкостью для растворителя (например шприцем с переходной насадкой).
5.2 Блендер, с баком смесителя на 500 мл и крышкой.
Рекомендуется использование высокоскоростного блендера.
5.3 Рифленая фильтровальная бумага, например, диаметром 24 см.
5.4 Фильтровальная бумага из стеклянного микроволокна, например, диаметром 11 см.
5.5 Мерные колбы по ГОСТ 1770, вместимостью 2 см3илипикнометрыпо ГОСТ 22524.
П р и м е ч а н и е — При использовании пикнометров рекомендуется измерять фактическое значение вмес
тимости и использовать его при обработке результатов измерений в качестве величины V
s
(
cm
. формулу (3)].
5.6 Спектрофотометр, предназначенный для измерения оптической плотности в диапазоне
длин волн от 200до 400 нм.
5.7 Кюветы изкварцевогостекла толщиной 1см. не имеющиесущественного поглощения вдиапа
зонедлин волн от 300до370нм.
5.8 Мембранный фильтр для водных растворов, изготовленный из политетрафторэтилена, диа
метром 4 мм и размером пор 0.45 мкм.
5.9 Оборудованиедля ВЭЖХ
5.9.1 Насос ВЭЖХ. способный производитьскорость потока 1см3/мин.
5.9.2 Система ввода (инжектор), со шприцевой загрузкой и петлей 50 мкл или эквивалентным.
5.9.3 Аналитическая разделяющая колонка с обращенной фазой, например С18. которая обеспе
чивает разрешениепиковафлатоксинов В,. В2,G, иG2до базовойлинииотвсехостальных пикови кото
рая имеет следующие характеристики:
- длина: 250 мм;
- внутреннийдиаметр: 4.6 мм;
4