ГОСТ Р 53162—2008
П р и м е ч а н и е — При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссы
лочных стандартов в информационной системе общего пользования — на официальном сайте Федерального
агентства по техническомурегулированию и метрологии в сети Интернет или по ежегодно издаваемому ука
зателю *Национальные стандарты», который опубликован по состоянию на 1январятекущего года, ипо соот
ветствующим ежемесячно издаваемым информационным указателям, опубликованным в текущем году. Если
ссылочный стандарт заменен (изменен), то при пользовании настоящим стандартом следует руководство
ваться заменяющим (измененным) стандартом. Если ссылочный стандарт отменен без замены, то положе ние.
в котором дана ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей эту ссылку.
3 Сущность метода
Анализируемый образец экстрагируют смесью метанола и воды. Экстракт образца фильтруют,
разбавляютводойивводят вколонкудля аффиннойхроматографии, содержащую антитела, специфич
ные для афлатоксинов В,. В2, G, и G2. Афлатоксины выделяют, очищают и концентрируют на колонке,
после чего отделяют от антител при помощи метанола. Афлатоксины определяют количественно при
помощи высокоэффективнойжидкостной хроматографии (ВЭЖХ) собращеннойфазойсопределением
флуоресценции ипослеколоночнойдериватизацией.
4 Реактивы
Приотсутствииспециальныхуказаний используютреактивы толькопризнанныханалитичес
кихмарокквалификации х.ч. или ч.д.а.
4.1 Вода, соответствующая не ниже 1-йстепени по ГОСТР 52501.
Вода не должна содержать органические примеси.
4.2 Хлорид натрия по ГОСТ4233.
4.3 Йод кристаллический по ГОСТ4159.
4.4 Афлатоксин, кристаллический или в виде пленочной ампулы.
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ! Афлатоксины канцерогенны для человека. Следует принимать во внима
ниезаявление, сделанное Международным агентством поисследованиям в области рака (ВОЗ) (см. [1],
(2)).
Необходимонадлежащим образом предохранятьлабораторию, вкоторой проводятсяанализы, от
дневного света. Для этого закрывают окна фольгой, поглощающей ультрафиолетовое излучение.
Допускается использоватьв комбинациисзатемненным освещением (когдаотсутствуетпрямоесолнеч
ное освещение) занавески или шторы в комбинации с искусственным освещением.
4.5 Ацетонитрил, степень чистоты для ВЭЖХ.
4.6 Метанол, ГОСТ6995. степеньчистоты ВЭЖХ.
4.7 Толуол ГОСТ5789.
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ! Толуол огнеопасен итоксичен. Приготовление стандартовсиспользовани
ем данного растворителя следует проводить в вытяжном шкафу. Операции за пределами вытяжного
шкафа, такие как измерение эталонов методом УФ спектрометрии, следует проводить с использовани
ем эталонов в закрытых контейнерах.
4.8 Смесь толуол/ацетонитрил
Смешивают 98 объемных частей толуола (4.7) с двумя объемными частями ацетонитрила (4.5)
(см. предупреждение в4.7).
4.9 Растворитель для экстракции
Смешиваютсемь объемныхчастей метанола (4.6) с тремя объемными частями воды (4.1).
Другие смеси — растворителидляэкстракции, которыесовместимы сподвижнойфазой, могуттак
жеиспользоваться, если покажут себяболееэффективнымиили будутрекомендованы производителем
иммуноаффинной колонки.
4.10 Подвижная фаза
Смешивают три объемные части воды (4.1) с одной объемной частью ацетонитрила (4.5) и одной
объемной частью метанола (4.6). Перед использованием проводятдегазацию раствора.
4.11 Реагентдля послеколоночной дериватизации
Растворяют 100 мг йода (4.3) в2 см3метанола(4.6). Добавляют200 см-воды (4.1), перемешиваютв
течение 1ч. фильтруют через мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм (5.8). Раствор готовят на
2