ГОСТ Р 53046—2008
с — массовая концентрация ферментного препарата в реакционной смеси, г/см3, вычисляют по
формуле
т
с =
VP2’
(
2
)
где т — масса навески ферментного препарата, г;
V— объем разведения навески при приготовленииосновного раствора по4.3.6. см3.
Р — разведение основного раствора ферментного препарата для приготовления рабочего раство
ра по4.3.9.2:
2 — разведение рабочего раствора в реакционнойсмеси.
4.5.3Целлюлолитическуюактивность ЦпА.ед/r. при определениис феррицианидом калиявычис
ляют поформуле
1C
гдеС0— молярнаяконцентрацияглюкозы вопытнойпробевсоответствиисградуировочным графиком.
мкмоль/см3;
Ск— молярная концентрация глюкозы в контрольной пробе в соответствии с градуировочным гра
фиком. мкмоль/см3:
р — коэффициентразведениярабочегораствора препарата поотношению к контрольному (основ
ному) раствору:
t
— продолжительностьгидролиза, ч;
с — массовая концентрация ферментного препарата в реакционной смеси, г/см3, поформуле (2).
4.5.4За окончательныйрезультатпринимаютсреднеарифметическоезначениерезультатовдвух
параллельныхопределений, округленноедо первогодесятичного знака (X ± Д).ед/r. при доверительной
вероятности Р =0,95, где
Д
=0,01 л X. Границы погрешности о= ♦7 %.
4.6 Сходимость и воспроизводимость результатов
4.6.1 Результаты измерений, полученные в условиях повторяемости (сходимости), признаются
удовлетворительными, если выполняется условие приемлемости:
|Х, -Х 2|5
г
0.01 X.(4)
гдеX, иХ2— результаты двух параллельныхопределений, полученные в условиях повторяемости при
Р=0,95,ед/п
X — среднеарифметическоедвух параллельных определений, ед/г,
г- 5 % — предел повторяемости (сходимости).
4.6.2 Результатыизмерений, полученныев условияхвоспроизводимости, признаются удовлетво
рительными. если выполняется условие приемлемости
\X
i
- X 2\£R 0.01 X.(5)
гдеX, иХ2— результатыдвух определений, выполненных вдвух разных лабораториях, ед/г:
X — среднеарифметическоедвух определений, выполненных вдвух разныхлабораториях,
ед/г;
R= 10 % — предел воспроизводимости.
5 Метод определения ферментативной активности целлюлазы
с использованием натриевой соли карбоксиметилцеллюлозы
5.1 Характеристика метода
5.1.1 Методоснованнаколичественном определении восстанавливающихсахаров, образующих
ся при действии ферментов целлюлолитического комплекса на натриевую соль карбоксиметилцеллю
лозы (Na-КМЦ).
5.1.2 За единицу целлюлолитической активности (1 ед. КМЦлА) принято количество фермента,
катализирующего гидролиз Na-КМЦдо образования 1мкмоля восстанавливающихсахаров (в пересче
те на глюкозу) за 1мин при температуре 50 вС. значении pH 4.7 ипродолжительности гидролиза 10 мин.
5.1.3 Содержание восстанавливающих сахаров, образующихся в результате ферментативной
реакции, определяют колориметрическим методом с ДНС-реактивом и рассчитывают по градуировоч-
7