ГОСТ Р 53046—2008
- весы лабораторные высокого или специального класса точности с наибольшим пределом взве
шивания 200 г иценой поверочногоделения 0.1 мгпо ГОСТ 24104:
- секундомер механический с пределом измерений 60 мин с ценой деления 0.2 с;
- водяную баню любого типа, которая обеспечивает поддержаниетемпературы (100
i
1)С:
- таймерлюбого типа с погрешностью i 30с;
- механическую мельницу, обеспечивающую размалывание исследуемого образца ферментного
препарата до полного прохода пробы через сито;
- сито с размером отверстий 1.0 мм, сделанное из металлического проволочного тканого мате
риала.
4.2.2 Для определения ферментативной активности целлюлазы используют следующие лабора
торную посуду и материалы:
- колбы мерные 1(2)-50,100.200.500.1000-2 по ГОСТ 1770:
- воронки ВФ — 1(2}-60-ПОР 500 ТХС ло ГОСТ 25336;
- пробирки П 1-14-120 ХС или П 1-16-150 ХС по ГОСТ 25336;
- пипетки по ГОСТ 29227;
- автоматические пипетки номинальной вместимостью от 0.1 до 1.0 см3с наконечниками:
- колбы и стаканы (бюксы)СВ 19/9 и24/10 по ГОСТ25336;
- стаканы В-1-25.50,100.150.250.600.800.1000 ТС по ГОСТ25336:
- цилиндры1(2.3,4}-50(100)поГОСТ1770
- ступку и пестикфарфоровые по ГОСТ 9147.
4.2.3 Для определения ферментативной активности целлюлазы используют следующие реак
тивы:
- кислотууксусную ледяную по ГОСТ61;
- натрий уксуснокислый трехводный поГОСТ 199;
- калий-натрий виннокислый четырехводный по ГОСТ5845:
- калий железосинеродистый по ГОСТ 4206,
- натрия тдроокись по ГОСТ4328;
- водудистиллированную поГОСТ 6709;
- кислоту3.5-динитросалициловую подействующимдокументам (ДНС);
- D-глюкозу по ГОСТ 6038;
- хроматографическую бумагу массой от 98до 102 мг (Watman No 1).
4.2.4 Все реактивы должны относиться к подгруппе чистоты 2(х.ч.) или 3 (чщ.а.) по ГОСТ 13867.
4.2.5 Допускается применение других средств измерений и вспомогательного оборудования с
метрологическимиитехническимихарактеристиками, а такжереактивовпокачествуненижеуказанных.
4.3Подготовка канализу
4.3.1 Для определения ферментативной активности целлюлазы приготавливают ацетатный
буферный раствор молярной концентрации 0.1 моль/дм3с pH 4.7.
4.3.1.1 Ацетатный буферный раствор готовят из растворов уксусной кислоты и уксуснокислого
натрия молярной концентрации 0.1 моль/дм3путем их смешивания.
4.3.1.2 Дляприготовлениярастворауксуснойкислоты в мерную колбуна 1дм3вносят 5.7см3ледя
ной уксусной кислоты и разводят в дистиллированной воде объемом от 200до 300 см3. Затем доводят
объем растворадистиллированной водой до метки иснова перемешивают.
Срокхранения раствора встеклянной посуде при комнатнойтемпературе — не более 1мес.
4.3.1.3 Для приготовления раствора уксуснокислого натрия в мерную колбу на 1дм3вносят 13.6 г
уксуснокислого натрия и растворяют вдистиллированной воде объемом от 200до 300 см3.Затем дово
дят объем растворадистиллированной водой до метки и перемешивают.
Срокхранения раствора при комнатной температуре — не более 1мес.
4.3.1.4 Для приготовления ацетатного буферного раствора смешивают равные объемы раство
ров уксусной кислоты иуксуснокислого натрия, полученных в соответствии с4.3.1.2 и 4.3.1.3. измеряют
pH и при необходимостидоводят значение pH до 4,7 одним из исходных растворов.
4.3.2 Для приготовления раствора натрия гидроокиси массовой доли 10,7 % растворяют 16,05 г
гидроокиси натрия в 150 см3дистиллированной воды. Полученный раствор охлаждают до комнатной
температуры.
4.3.3 Для приготовления реактивадииитросалициловой кислоты (ДНС)массовойдоли 1.0% вста-
кан вместимостью 1 дм3вносят 10.0 гДНС и400 см3дистиллированнойводы. Перемешиваютна магнит
ной мешалке в течение 25—30 мин при комнатной температуре. Затем постепенно, при постоянном
перемешивании, добавляют 150 см3 раствора гидроокиси натрия. При этом окраска раствора меняется
от светло-желтойдо ярко-желтой.
3