ГОСТ 30705-2000
6.1.2.4Для приготовления каждого разведения используют отдельно взятую стерильную пи
петку, вводя ее в пробирку ниже уровня поверхности взвеси от 2 до 3 см.
Время от момента приготовления разведений до посева не должно превышать 30 мин. Перед
посевом все разведения осторожно встряхивают. При посеве на чашки Петри или в пробирки
посевной материал вносят от большего разведения к меньшему, пользуясь при этом одной пипеткой.
6.2 Посев на чашки
Перед посевом чашки маркируют. На дне чашки карандашом по стеклу ставят номер исследу
емого образца продукта, разведение и дату.
По 1см’ цельного продукта или каждого соответствующего его разведения вносят в 2 чашки
Петри (параллельные определения). Пипетку с посевным материалом держат под углом 45*, касаясь
конном пипетки дна чашки, нс выдувая последнюю кашпо из пипетки. В каждую чашку вносят от
15 до 20 см5питательной среды, расплавленной на водяной бане и охлажденной до (43±2) ’С.
Края колб с питательной средой перед каждой заливкой фламбируют в пламени газовой горелки
или спиртовки. Сразу после заливки среды содержимое чашки Петри перемешивают путем легкого
вращательного покачивания для равномерного распределения посевного материала.
6.3 Инкубация
После застывания среды чашки Петри переворачивают крышками вниз и помешают в таком
виде в термостат при (30±1) ‘С на (72±3) ч. Допускается предварительный учет количества выросших
колоний через (48±1) ч с последующим окончательным учетом еше через (24±1) ч.
Чашки Петри с посевами распределяют в термостате таким образом, чтобы каждая их группа
отделялась от соседних чашек, от верха и стенок термостата не менее чем на 3 см.
7 Правила обработки и оформления результатов определения
7.1 Обработка результатов
Количество выросших колоний подсчитывают на перевернутой вверх дном чашке, поместив
ее на темном фоне, пользуясь лупой с увеличением от 4 до 10 раз. Каждую подсчитанную колонию
помечают на дне чашки. Рекомендуется пользоваться прибором для подсчета колоний бактерий.
При большом количестве колоний (более 100) и равномерном их распределении дно чашки
Петри делят на четыре и более равные сектора, подсчитывают количество колоний на двух-трех
секторах (но не менее чем на одной трети плошади поверхности чашки), находят среднее арифме
тическое значение количества колоний на одном секторе и умножают на количество секторов всей
чашки. Таким образом находят общее количество колоний, выросших на одной чашке.
7.2 Оформление результатов
Подсчитывают количество колоний на обеих чашках с одним и тем же разведением и вычис
ляют среднее арифметическое значение М.
Если инкубированные чашки с разведением 1:10 не содержат колоний, то результат выражают
так: менее 1x10’ или менее 10 бактерий в 1см5(г) продукта.
Если посев продукта проводится при нескольких разведениях (1:10. 1:100 и т. д.), то подсчи
тывают количество колоний при каждом разведении.
Количество микроорганизмов At в 1см-’ или в I г продукта при каждом разведении вычисляют
по формуле
А, = М
10
".
( I )
где Л/ —количество выросших колоний;
п —степень разведения продукта.
Затем вычисляют среднеарифметическое значение А количества микроорганизмов, которое
принимают за окончательный результат
2
А
( )
где к— количество чашек всех разведений.
Ответ выражают в виде количества КОЕ/г или (КОЕ/см’) с указанием соответствия или
несоответствия показателя продукта микробиологическому нормативу на этот продукт.
Норматив оперативного контроля сходимости при доверительной вероятности 0.95 равен 34 %,
воспроизводимости —40 % в диапазоне определения общего количества мезофильных аэробных и
6