ГОСТ Р 52832—2007
5.7 Бульон наоснове сердечно-мозгового перевара (бульон BHI)
5.7.1 Состав:
ферментативный переварживотных тканей — 10,0 г;
обезвоженный перевар телячьего мозга—12.5 г;
обезвоженный перевар бычьего сердца — 5.0 г;
глюкоза — 2.0 г;
хлорид натрия — 5,0 г:
моногидрофосфат натрия, безводный (№2НРОд) — 2.5 г,
вода — 1000 см3.
5.7.2 Приготовление
Растворяют компоненты среды или готовую дегидратированную питательную среду в воде, при
необходимости подогревают. Устанавливают такой уровень pH. чтобы после стерилизации он соответ
ствовал 7.4 ±0.2 при температуре 25 °С.
Средуразливают по 5 см3 впробирки (см. 6.11).
Средустерилизуютпри (121 ± 1)°С в течение 15 мин.
5.8 Тест-микроб (положительный контроль)
В качестве положительного контроля используют любой штамм Staphylococcus aureus, образую
щий термонуклеазу.
6 Оборудование илабораторная посуда
Используют оборудование, необходимое для подготовки проб согласно ГОСТ Р ИСО 7218. обыч
ное лабораторное оборудование, а также следующее:
6.1 Термостат, поддерживающий температуру (37 ± 1)°С.
6.2 Водяная баня, поддерживающая температуру (50± 1)°С, а такжетемпературу кипячения (для
разогрева и охлаждения питательныхсред и реактивовдо необходимой температуры).
6.3 Центрифуга с частотой вращения более 27000 мин*1.
6.4 Центрифуга с частотой вращения более 2800 мин*1.
6.5 Металлический цилиндрический пробойник диаметром около 2 мм. для прорезания лунок в
толуидиновом синем О-ДНКагаре.
6.6 Микропипетки вместимостью 0,01 см3.
6.7 Бактериологические петли из проволоки платино-иридиевого или никельхромового сплава
диаметром около 3мм.
6.8 Чашки Петри, стеклянные или пластиковые, диаметром 90 и 100 мм.
6.9 Мерные цилиндры вместимостью 10.100 и 1000 см3.
6.10 Бутыли с пробками, для хранения толуидинового синего О-ДНКагара.
6.11 Пробирки диаметром 15 мм и длиной 100 мм.
6.12 Марля.
При одинаковойспецификации одноразовое оборудование предпочтительнее многоразового.
Стеклянная лабораторная посуда должна выдерживать повторные циклы стерилизации и быть
химически инертной.
7 Отбор проб
Отбор проб не является частью метода, приведенного в настоящем стандарте. Рекомендуемым
методом отбора проб является метод, приведенный в ГОСТ26809.
Образцы хранят в условиях, предотвращающих их порчу илюбые изменения в составе.
8 Проведение испытания
Величину pH молока, восстановленного сухого молока или гомогенизированных продуктов на
основе молока последобавкиобезжиренногосухого молока доводятдо 3.8 ицентрифугируют. Суперна
тант осаждают трихлоруксусной кислотой. Центрифугируют. pH осадка доводятдо pH 8.5 идобавляют
трис-буфер. Раствор прогреваютна кипящей водянойбанев течение 15мин иопределяютналичиетер-
монуклеазной активности на толуидиновом синем О-ДНКагаре.
з