ГОСТ Р 52830—2007
9 Проведение определения
9.1 Метод качественного определения
9.1.1 Приготовление пробы и первичного разведения в зависимости от вида продукта соглас
но ГОСТР 51426. ГОСТР51448. ГОСТ26669. [5]. [6]unu[7J.
СоставЕС-бульона с лаурилсульфатомприопределеннойконцентрации согласнотаблице 1а)
u b ) .
Добавляют 1 см3первичного разведенияк9 см3бульонаслаурилсульфатомодинарнойконцентра
ции(0.1 гилиО.1 см3образца) или 10см3первоначальногоразведенияк10см3бульонаслаурилсульфа-
том двойной концентрации (1 г или 1см3образца). Для больших объемов пробы первичное разведение
приготавливаютдобавлением 0.1 см3или 0.1 гк 9см3разбавителя (ГОСТР 51426или (7]). затемдобав
ляют весь объем первичного разведения к 90 см3бульона с лаурилсульфатом одинарной концентра
ции. Например, добавляют 5см3или 5 г образца к 45 см3 разбавителя, и весь объем начальной суспен
зии вносят в 450 см3бульона с лаурилсульфатом одинарной концентрации или вносят пробу в равный
объем.
9.1.2 Инкубация селективного обогатительного бульона (бульона с лаурилсульфатом)
Инокулированныйбульонслаурилсульфатом одинарнойили двойнойконцентрации(см. 5.2)инку
бируютв термостате (см. 6.2). притемпературе 37 X в течение (24 ♦.2)ч. Если наэтой стадии не обна
руживают ни газообразования, ни замутнения среды, затрудняющего определение газообразования,
продолжают инкубацию до (48 12) ч.
П р и м е ч а н и е — Время инкубации проб живых моллюсков должно составлять (48 ± 2)ч.
При исследовании некоторых молочных продуктов (например, казеина) пробирки-поплавкиДаре
мамогутзастреватьнадне пробиркис селективнойобогатительнойсредой. Если после48ч инкубации в
пробирке обнаруживается лишь помутнение без газообразования, то также осуществляют пересев в
EC-бульон согласно 9.1.3.
9.1.3 Инокуляция и инкубация селективной среды (ЕС-6ульона)
При обнаружении помутнения, выпаденияосадка или видимогогазообразования после инкубации
(см. 9.1.2) селективной среды двойной концентрации или при обнаружении видимого газообразования
после инкубации селективной среды одинарной концентрации с помощью бактериологической петли
(см.6.5)проводятпересевв пробиркусEC-бульоном. Инокулированный EC-бульон инкубируютнаводя
ной бане(см. 6.3)или втермостате (см. 6.2)(24 ± 2)ч при температуре44X . Еслина этой стадиинеобна
руживают видимого газообразования в EC-бульоне (см. 5.3), то общее время инкубации продлеваютдо
(48 ±2)ч.
П р и м е ч а н и е — Общее время инкубации проб живых моллюсков должно составлять (24 г 2)ч.
9.1.4 Инокуляция и инкубация пептонной воды
При обнаружении видимого газообразованияпослеинкубациисогласно9.1.3спомощьюбактерио
логической петли (см. 6.5) производят пересев в пробирку с пептонной водой (см. 5.4). предварительно
прогретой до температуры 44 X . Инкубируют(48 i 2) ч при температуре44 X .
9.1.5 Обнаружение образования индола
В пробирку с пептонной водой (см. 5.4)после инкубациисогласно 9.1.4добавляют0.5см3реактива
на индол (см. 5.5). После интенсивного перемешивания через 1мин проводят оценку реакции. Красное
окрашивание в спиртовой фазе свидетельствуето наличии индола.
9.1.6 Оценка результатов
При обнаружении видимого газообразования в пробирке с EC-бульоном и образования индола в
пробирке с пептонной водой (см. 9.1.2—9.1.4) селективную обогатительную среду оценивают какполо
жительную (лрезумптивная Escherichia coliобнаружена).
9.2Метод количественного определения
9.2.1Приготовление пробы ипервичного разведения в зависимости от вида продукта соглас
но ГОСТР 51426. ГОСТР51448. ГОСТ26669. [5]. [6]или[7).
Подготавливают достаточное число разведений, чтобы в максимальном разведении с уверен
ностью получитьотрицательный результат.
5