ГОСТ Р 5047 9 -9 3 С. 4
5.3. П р о в е д е н и е ц в е т н о й р е а к ц и и
Для проведения цветной реакции используют 8 пробирок или колб с притертыми пробками.
В три пробирки пипеткой вносят по 5 см3 рабочего стандартного раствора витамина РР, приготов
ленного по п. 4.2. В 4 пробирки вносят пипеткой по 5 см3 полученного фильтрата, в
контрольную пробирку — 5 см3 воды вместо фильтрата. Все пробирки закрывают пробками и
нагревают на водяной бане при температуре 48—52 *С в течение 5—10 мин. Затем в пробирки
со стандартным раствором витамина, в пробирку с водой и вдве пробирки с испытуемым
фильтратом добавляют из бюретки в вытяжном шкафу по 2 см3 роданбромидпого раствора.
Все пробирки закрывают пробками, встряхивают и оставляют на водяной бане при температуре
(50±2) *С 10 мин. Через 10 мин все пробирки охлаждают водой до комнатной температуры, остав
ляют на 10 мин в темном месте, затем в каждую из них добавляют по 3 см3 раствора метола,
встряхивают и остаачяют на I ч в темном месте. После этого измеряют оптическую плотность
растворов на фотоэлектроколориметре или спектрофотометре. Контрольным раствором служит
дистиллированная вода.
Если растворы, полученные по п. 5.3, мутные, то перед измерением оптической плотности их
фильтруют в кювету через бумажный фильтр.
6. ОБРАБОТКА РЕЗУЛЬТАТОВ
6.1. Массовую долю витамина РР (X) в процентах вычисляют по формуле
IА , — А ) V ■V| •т
(В , — В) т х ■V1 - У}
0
\ ~ \
где Л, — значение оптической плотности испытуемого раствора;
Л — значение оптической плотности раствора для поправки на окрашенные посторонние
вещества;
V— общий объем гидролизата, см’;
К, — объем раствора после очистки сернокислым цинком, см3;
т — масса витамина РР в 5 см3 рабочего стандартного раствора, мкг, т = 10 мкг;
В, — значение оптической плотности рабочего стандартного раствора витамина РР (среднее
значение из трех параллельных определений);
В —значение оптической плотности контрольного раствора:
/м, — масса навески, г;
V2 —объем гидролизата, взятого на очистку, см3;
И3 — объем очищенного пиролизата, взятого для проведения цветной реакции, см3.
6.2. За окончательный результат испытания принимают среднеарифметическое значение (X)
двух параллельных определений, рассчитанных до четвертого и округленных до третьего десятичного
знака, расхождение между которыми при Р = 0,95 не должно превышать 13 % по отношению к
среднеарифметическому значению.
6.3. Минимальная концентрация витамина РР, определяемая указанным методом, составляет
0,5 мкг в 1 см3 колориметрируемого раслюра.
6.4. Допускаемое расхождение между результатами испытаний, выполненных в двух разных
лабораториях при Р = 0.95, не должно превышать 30 % по отношению к среднеарифметическому
значению.
237