ГОСТ Р 51198-98
- 0,20 см3 раствора ИН Г (5.5) н
- 0,05 см3 раствора линоаминдегидрогеназа (5.6).
Затем в одну кювету вносят 0,50 см3 экстракта (8.3.6), получая исследуемый раствор, а во
вторую —0,50 см3 воды, получая контрольный раствор.
Растворы в кюветах перемешивают пластиковыми шпателями или стеклянными палочками
(6.9) и измеряют оптические плотности относительно воздуха при длине волны 492 им: А, —
оптическая плотность исследуемого раствора, Аи — оптическая плотность контрольного раствора.
Температура растворов должна быть от 20 до 25 *С.
8.4.2 В каждую кювету вносят по 0,05 см3 раствора ГДГ (5.7) и тщательно смешивают с
содержимым, используя шпатель или стеклянную палочку (6.9).
Растворы выдерживают 15 мин. Затем измеряют оптические плотности при длине волны
492 нм, повторяя измерения через каждые 2 мин до достижения постоянных значений.
Строят графики зависимости оптических плотностей растворов от времени и экстраполируют
их на момент внесения фермента ГДГ (приложение А).
Получают экстраполированные значения оптических плотностей исследуемого (А2) и контроль
ного (Л2Д растворов.
8.4.3 Определяют микромолярный коэффициент оптической плотности формазана, повторяя
операции по 8.4.1 и 8.4.2. но заменяя 0,5 см3экстракта в первой фотометрической кювете на 0,5 см3
стандартного раствора L-(+)-глутаминовой кислоты (5.8).
Получают следующие значения оптических плотностей:
- А \ —стандартного раствора Ь-(+)-глугаминовой кислоты;
-
А
\к — контрольного раствора:
- А ; —стандартного раствора L-(+)-глутаминовой кислоты;
- A— контрольного раствора.
8.5 Выполняют два параллельных определения в двух пробах из одного и того же образца (8.1).
9 Правила обработки результатов измерений
9.1 Метод расчета
Массовую долю L-(+)-глугами новой кислоты в пробе X, %. вычисляют по формуле
X = ДА х
3.5 х 147,1
А.х 0,5 х 1000
<|00+;тдг>
100
50 т
ДА
51,485х
kx.Vx.rn
х ( 1 0 0 т ^ ) ,
где Д А =(Л, —А ) —(4и — A J;
147,1 —молярная масса 1_-(+)-глутаминовой кислоты;
Л/ —массовая доля влаги в пробе, определенная по ГОСТ 9793;
т —масса навески (8.2), г;
V— объем фильтрата, взятый на определение (8.3.6). см3;
А—микромолярный коэффициент оптической плотности формазана при длине волны 492 нм,
с.м2/мкмоль, рассчитанный по формуле
50
А» Д
А
’ х ~ х
1000
х 147.1 - 51.485 хДЛ’ ,
у
где ДА ’ = </Г2 - /Г,) - ( Г2
к
- А’и ).
За результат измерений принимают среднеарифметическое значение результатов двух парал
лельных определений при условии выполнения 9.2.
Результат определяют с точностью 0,01 %.
9.2 Сходимость
Относительное расхождение результатов двух параллельных определений, выполненных в
одной лаборатории, не должно превышать 10 % среднеарифметического значения.
4122