ГОСТ Р 51198-98
Вода, используемая для приготовления растворов химических реагентов и подготовки проб,
должна быть дистиллированной или деминерализованной.
П р и м е ч а н и с —Однократно дистиллированная вода может содержать ноны металлов, которые сни
жают активность ферментов, а деминерализованная вода может содержать микроорганизмы, увеличивающие
нссиецифичсскую фоновую ферментативную активность и искажающие результаты анализа.
Препарат НАД должен содержать не менее 90 % основного вещества.
L-(+)-глутаминовая кислота должна содержать не менее 98 % основного вещества.
Допускается использовать имеющиеся в продаже готовые наборы реактивов при условии
соответствия качества реактивов требованиям настоящего стандарта.
5.1 Раствор хлорной кислоты с (НСЮ4) — 1,0 моль/дм3
8.6см3 раствора хлорной кислоты массовой доли 70 % и плотности 1.67 г/см3 помещают в
мерную колбу вместимостью ИЮсм3 и доводят объем раствора до метки водой.
П р и м е ч а н и е —При использовании хлорной кислоты меньшей массовой доли проводят перерасчет
объема кислоты, используемой для осаждения белков.
5.2 Раствор гидроксида калия
с
(КОН) = 2 моль/дм3
Растворяют 56.1 г гидроксида калия (КОН) в воле, доводят объем раствора до 500 см3.
5.3 Буферный раствор активной кислотности 8,6 pH
5.3.1 Растворяют 1.86 г гидрохлорида триэтаноламина в воде, доводят активную кислотность
раствора до 8,6 pH раствором гидроксида калия (5.2), используя для измерений pH-метр. Затем
добавляют 0,68 г октилфенолдекаэтиленгликоленого эфира (например, Тритон X - 100) и доводят
объем раствора до 100 см3 водой.
5.3.2 Растворяют 0.86 г двузамещеиного фосфорнокислого калия (К2НР04) и 0,007 г одноза-
мещеиного фосфорнокислого калия (КН ,Р04) в воде и доводят объем раствора до 100 см3.
5.3.3 Смешивают 20 см3 раствора по 5.3.1 и 5 см3раствора по 5.3.2.
Раствор хранят при температуре 4 *С.
5.4 Раствор НАД
Навеску НАД массой 0,025 г растворяют в 5.0 см3 воды в небольшой колбе со шлифом, колбу
закрывают пробкой.
Раствор устойчив не менее 1 мес при температуре 4 *С.
5.5 Растворйодоннтротетразолия[2-(р-йодофс11ил)-3-(р-нитрофемил)-5-фснилтетразо.1ия|
хлорида (ИНТ-хлорида)
Растворяют 0,030 г ИН Г-хлорида в 50 см3 воды, колбу закрывают пробкой.
Раствор устойчив не менее 2 мес при температуре 4 "С в темноте.
5.6 Раствор ЛАДГ
Растворяют 0.003 глиофильно высушенной липоаминдегидрогеиазы в I см’ воды.
Раствор устойчив не менее трех недель при температуре 4 "С.
5.7 Раствор ГДГ
Используют раствор глютаматдегидрогеназы концентрации 10 мг/см1, свободный от сульфата
аммония, этиленднаминтетрауксусной кислоты и глутаминазы, поставляемый в готовом виде
(например, в расфасовке по 1.0 см3), удельной активностью не менее 900 Е/см3.
Раствор устойчив не менее 12 мес при температуре 4 ”С.
5.8 Стандартный раствор Ь-(+)-глутамн
1
Ювой кислоты
Растворяют 0.050 г Е-(+)-глутаминовой кислоты в 25 см3воды. Активную кислотность раствора
устанавливают 7.0 pH раствором гидроксида калия (5.2), после чего доводят объем раствора до 50 см3.
Раствор храпят при температуре 4 ’С и непосредственно перед использованием разводят водой
в соолюшении объемов 1 : 49.
6Средства контроля и вспомогательные устройства
Обычная лабораторная аппаратура, а также указанная в 6.1 —6.11.
6.1 Мясорубка механическая лабораторная, снабженная перфорированной пластинкой с от
верстиями диаметром не более 4 мм.
6.2 Миксер лабораторный.
6.3 Центрифуга лабораторная с пробирками вместимостью 50 или 100 см3.
6.4 Иономер или pH-метр диапазоном измерений от 1до 14 pH и допускаемой погрешностью
± 0.05 pH.
6.5 Фильтры бумажные гофрированные диаметром 15 см.
■>
120