ГОСТ 2W09.2—75 С. 5
В отдельных пробирках готовят 10%-ный спиртовой раствор
основного фуксина и 10%-ный водный-растворсернистокнслого
натрия.
К 0,5 мл отфильтрованного спиртового раствора основного фук
сина добавляют водный раствор серинстохяслого натрия до полу
чения бледно-розового окрашивания. Приготовленную смесь при
ливают к 100 мл расплавленного МПа с лактозой, хорошо переме
шивают и разливают по чашкам. Среду готовят в день примене
ния. Применяют также и сухую готовую среду Эндо.
(Измененная редакция, Иэм. ■№I).
3.2.5. Приготовление среды Булира
К МПБ добавляют 0.25% маннита и pH среды доводят до
7,0—7,4. Затем питательную среду помещают в автоклав, где вы
держивают при температуре 115—120°С и кипятят в течение
15 мин. Добавляют насыщенный водный раствор нентральрота
(порошок растворяют в воде, нагретой до кипения) до окраши
вания смеси в вишнево-красный цвет. Смесь фильтруют, разли
вают по 7 мл в пробирки с поплавками н выдерживают в авто
клаве при температуре 120°С в течение 15 мин.
3.2.6. Приготовление реактивов для окраски по Граму
Реактив I—кристаллвнолет-карболовый раствор.
1 г крнсталлгенцианвиолета или кристаллметилвнолета расти
рают в фарфоровой ступке с 2 г карболовой кристаллической кис
лоты и несколькими (3—5) каплями глицерина. Во время растира
ния небольшими порциями прибавляют 10 мл 96%-ного спирта
ректификата. После тщательного растирания приливают при по
стоянном помешивании 100 мл дистиллированной воды. Раствор
оставляют на сутки и фильтруют через бумажный фильтр. Краску
используют в течение 1—2 месяцев при условии хранения ее в
темном прохладном месте (2—5ЭС).
Реактив 2—раствор Люголя.
2 г йодистого калия расторяют в 5—10 мл дистиллированной
воды, прибавляют 1 г кристаллического йода, раствор оставляют
на несколько часов до полного растворения йода н после этого
доливают дистиллированной воды до 300 .мл.
Реактив 3—96%-ный спирт ректификат.
Реактив 4—спирто-водный раствор фуксина.
Для приготовления реактива растворяют 1 мл насыщенного
раствора фуксина (основного фуксина — 8—9 г, спирта этилового
—100 мл) в 10 мл дистиллированной воды.
3.2.7. Приготовление реактивов для окраски по Граму в моди
фикации Калины
Реактив I—0.5%-ный спиртовый раствор кристаллвиолета.
Реактив 2—к 70 мл 0,5%-ного спиртового раствора йодисто
го калия добавляют 10 мл 5%-ного спиртового раствора основного
фуксина, 10 мл 10%-ного спиртового раствора йода и 10 мл.аце-