ГОСТ 26073
—*4
Стр. 7
Перед употреблением к расплавленному в водяной бане полу
фабрикатудобавляют 20% стерильной,инактивированной при
50°С в течение 1 ч сыворотки крупного рогатого скота и пени
циллин из расчета 50 ЕД на I см3 среды.
Готовую среду разливают по пробиркам, скашивают, выдер
живают при комнатной температуре в течение 24 ч. Для проверки
на стерильность пробирки со средой помещают в термостат на
2—3 сут при температуре 38°С. При посевах используют свежую
среду, приготовленную не более чем за 14 сут до исследования.
Среды хранят в сухом прохладном месте.
3.2. Проведение исследования
3.2.1. Фекальные массы, измельченные и растертые в ступке
(около 10 см3), смешивают с 10 частями 5%-ного раствора ша-
нелевой кислоты в стерильном флаконе с крышкой и встряхивают.
Флакон со смесью ставят на 20—30 мин при 37°С на водяную
баню, а затем центрифугируют с частотой вращения 2500—
3000 об/мин в течение 15 мин.
После центрифугирования отделяют надосалочную жидкость,
осадок отмывают стерильным физиологическим раствором, затем с
поверхности его бактериологической петлей берут материал н
высевают в 5—6 пробирок с питательной средой с мнкобактином
и для контраста в среду Левенштсйиа—Пенсена.
3.2.2. Кусочки лимфатических узлов и отдельно соекобы
(ткань) слизистой оболочки и подслизистого слоя кишечника (5—
6 кусочков) измельчают ножницами до 2—3 мм и помещают в
разные стерильные ступки, покрытые пергаментной бумагой.
Лимфатические узлы заливают 3%-ным раствором серной кис
лоты в соотношении 1:10, а слизистую оболочку кишечника —
6%-ным раствором этой кислоты и выдерживают в течение 10—
15 мин.
Раствор серной кислоты сливают, а патологический материал
заливают в зависимости от концентрации серной кислоты на 5
или 10 мин соответственно стерильным физиологическим раство
ром в таком же объеме.
Физиологический раствор сливают, кусочки материала расти
рают и суспензируют в небольшом количестве стерильного физи
ологического раствора, а затем высевают в 5—6 пробирок на пи
тательную среду с мнкобактином и среду Левенштсйиа- Йенсена,
как указано в п. 3.2.1.
Питательные среды после высева материала выдерживают в
термостате при 38еС в течение 3—4 мес.
Рост возбудителя наратуберкуле.за на средах с сильным обсе
менением тканей появляется через 18—20 сут, при слабом — в те
чение 3—4 мес.Культуры вырастаютв виде плоских колоний
с неровными краями и ядром в центре. В дальнейшем они прини
мают бугристый вид.