ГОСТ Р 51454-99
рованной водой до метки и перемешивают. Затем пропускают раствор через восстановительную
колонку при скорости потока 10 см3/мин.
При необходимости повторяют процедуру по 7.5.3.
7.8 Контрольный раствор
Раствор готовят в соответствии с 9.2, 9.3, 9.4.1—9.4.3 включительно с использованием тех же
объемов всех реагентов, но не используя навеску казеина или казеината.
7.9 Построение калибровочного графика
7.9.1 В семь мерных колб вместимостью 100 см’ налипают при помощи пипетки 0: 2; 4; 6; К;
12; 20см ’стандартного раствора нитрита натрия по 6.4.2. Вкаждую мерную колбу доливают дистил
лированную воду до общего объема, равного 60 см3.
7.9.2 Затем в каждую мерную колбу приливают по 6 см3раствора № I по 6.3.1, добавляют по
5 см3раствора № 2 по 6.3.2 и тщательно перемешивают, оставляя на 5 мин при комнатной темпера
туре в защищенном от света месте.
7.9.3 Добавляют по 2 см3раствора .Nfe3 по 6.3.3, перемешивают, оставляя на 5 мин при ком
натной температуре в защищенном от света месте, доливают дистиллированной водой до метки и
перемешивают.
7.9.4 В течение 15 мин после приготовления раствора по 8.8.3 измеряют его оптическую плот
ность относительно оптической плотности раствора, не содержащего нитрита натрия, при длине
волны 538 нм.
7.9.5 Строят калибровочный график зависимости относительной оптической плотности рас
творов от массовой концентрации нитрита в микрограммах на кубический сантиметр по 7.9.1.
8 Подготовка пробы
8.1 В колбу вместимостью 250см3помешают (50±1) г казеината или казеина, закрывают колбу
пробкой и перемешивают не менее чем десятикратным переворачиванием и встряхиванием колбы.
8.2 Тщательно перемешанную пробу переносят на лабораторное сито.
8.3 Если 50 г пробы полностью просеивается через сито, то проба пригодна для дальнейшей
работы.
8.4 Если проба полностью или частично не проходит, то с помощью мельницы размалывают
(50±5) г пробы. Пробу просеивают и переносят в колбу, вместимостью 250 см5, закрывают пробкой
и тщательно перемешивают не менее чем десятикратным переворачиванием колбы. Во время про
ведения этих работ исключают попадание влаги в продукт.
9 Проведение определения
9.1 Отбирают навеску пробы массой (№±0.01) гдля казеина или
(2±0,01)
г для казеината по 8.4.
9.2. Получение фильтрата
9.2.1 В коническую колбу вместимостью 500 см3помещают навеску казеина или казеината по
9.1, постепенно добавляют 136 см3 дистиллированной воды температурой от 50до 55 "С и 10 см3бу
ферного раствора по 6.6, периодически встряхивая и используя магнитную мешалку, перемешивают
до полного ее растворения.
9.2.2 Затем последовательно доливают 12 см3 раствора сернокислого цинка по 6.2.1, 12 см3
раствора железистосинеродистого 3-водного калия по 6.2.2 и 30 см3буферного раствора по 6.6. тща
тельно перемешивая вращением после внесения каждого компонента.
9.2.3 Оставляют смесь в покое от 15 до 60 мин до получения прозрачною раствора. Затем
фильтруют отстоявшийся раствор через фильтровальную бумагу, собирая фильтрат в коническую
колбу вместимостью 250 см3.
9.3 Получение элюата (восстановление нитрата до нитрита)
9.3.1 В приемную часть восстановительной колонки в соответствии с рисунком I пипеткой
отмеряют 20 см5 фильтрата по 9.2.3, вносят 5 см3буферного раствора по 6.6 и аккуратно перемеши
вают стеклянной палочкой. Пропускают смесь через восстановительную колонку.
9.3.2 В мерную колбу вместимостью 100 см3 собирают элюат при скорости потока не более
6см5/мин. Затем промывают колонкудвумя последовательными порциями дистиллированной воды
по 15 см3, полностью заполняют колонку дистиллированной водой и пропускают при полностью
открытом кране.
6
76