ГОСТ Р ИСО 13493—2005
9.5 Жидко-жидкостная экстракция
К остатку добавляют 400 мм3 воды (V3) и 2.0 см3 толуола (5.4) и перемешивают с умеренной
интенсивностью в течение 1 мин на смесителе Вортекс (6.9) с частотой вращения примерно 700 мин- ’.
Центрифугируют в течение 5 мин на центрифуге (6.10) с радиальным ускорением 1000 д.
Пипеткой отбирают как можно больше органической фазы и отбрасывают ее.
Добавляют 1.5 см3 толуола и перемешивают с умеренной интенсивностью в течение 1 мин на
смесителе Вортекс (6.9) с частотой вращения примерно 700 мин-1.
Центрифугируют в течение 5 мин на центрифуге (6.10) с радиальным ускорением 1000 д.
Пипеткой отбирают как можно больше органической фазы и отбрасывают ее.
Микропипеткой (6.11) переносят 300 мм3водной фазы в подходящий сосуд.
9.6 Хроматографический анализ
9.6.1 Условия хроматографирования
Длина волны
Диапазон шкалы детектора
Шкала самописца
Скорость бумаги самописца
Объемная скорость потока подвижной фазы (5.7)
Объем анализируемого раствора, вводимый (ин
жектируемый) в хроматограф
ПараметрЗначение
285 нм
от 0.005 до 0,010 единиц оптической плотнос
ти. что соответствует полной шкале само
писца
10 мВ
1.0 см/мин
0.6 см3/мин
100 мм3
П р и м е ч а н и е — Инжектируемый объем и объемная скорость потока зависят от размеров колонки.
9.6.2 Хроматографирование
После стабилизации системы жидкостного хроматографа (6.12) инжектируют растворы, получен
ные из образца-бланка и образца-бланка с внесенным хлорамфениколом, четыре стандартных раствора
хлорамфеникола (5.9), раствор, приготовленный из испытуемого образца по 9.5. и снова стандартные
растворы хлорамфеникола (5.9).
На хроматограммах образцов проверяют наличие сигнала на участке, соответствующем времени
удерживания хлорамфеникола.
9.6.3 Измерение
Измеряют высоты или площади хроматографических пиков хлорамфеникола для испытуемого
раствора и стандартных растворов хлорамфеникола.
Измеренные для стандартных растворов высоты или площади пиков должны линейно зависеть от
содержания хлорамфеникола в этих растворах.
П р и м е ч а н и е — С помощью диодно-матричного детектора может быть подтверждено обнаружение хло-
рамфенихола при его содержании вобразце более 10 мкг/кг.
10 Обработка результатов измерений
Содержание хлорамфеникола iv, мкг/кг. в испытуемом образце рассчитывают по формуле
где
h
— высота или площадь пика в единицах длины или площади, измеренные для испытуемого
раствора;
/?, — высота или площадь пика, измеренные для одного из стандартных растворов (5.9);
р — содержание хлорамфеникола в стандартном растворе, мкг/см3:
т
— масса испытуемой пробы (9.2), г;
V, — объем водной фазы, полученной после гомогенизации по 9.3. см3(V, = 40 см3♦ объем воды в
пробе, взятой на испытание);
А