С. 9 ГОСТ 24849-81
тест. Мембранный фильтр колониями вверх переносят на кружок фильтроваль
ной бумаги, смоченной реактивом для определения оксидазной активности.
Учитывая бактернцндностъ реактивов для определения оксидазной активнос
ти, мембранный фильтр сразу после проявления реакции следует перенести
обратно на среду Эндо и не позднее 5—7 мин пересеять оксидазоотрицательные
колонии в полужидкую среду с глюкозой (если это необходимо по дальнейшему
ходу анализа).
Наличие активной оксидазы (изменение цвета колоний на сине-фиолето
вый) у всех колоний, за исключением нехарактерных для БГКП, позволяет дать
отрицательный ответ и закончить анализ через 18—24 ч.
Если выросли колонии, не обладающие оксидазной активностью, то из
нескольких колоний каждого типа готовят мазки, окрашивают по Граму и
микроскопируют. Отсутствие в мазках грамотрииательных. не образующих спор
палочек позволяет дать отрицательный ответ и закончить анализ через 18—24 ч.
Если красные и темно-красные колонии с металлическим блеском и без него
(лактозоположнтельные) образованы грамотрицательнымн палочками, не обла
дающими оксидазной активностью, то их число подсчитывают и при содержа
нии свыше трех в 1 дм3 питьевой воды централизованного водоснабжения и
свыше 10 в I дм3 воды децентрализованного водоснабжения немедленно (через
16—18 ч) дают ответ о наличии фекального загрязнения, превышающего норму.
В сомнительных случаях, когда нет уверенности, что колонии образованы
бактериями, ферметлфующими лактозу, а также при наличии на фильтрах
розовых, розовых с центром, бесцветных колоний грамотрииательных и окси
дазоотринательных палочек их подсчитывают (каждый тип колоний отдельно)
и принадлежность к БГКП подтверждают посевом двух-трех изолированных
колоний каждого типа в полужидкую среду с глюкозой. Учет проводят через
4—5 ч инкубации посевов при 37 *С.
При образовании кислоты и газа результат считают положительным, при
отсутствии кислоты и газа — отрицательным. Анализ заканчивают через 24—
28 ч. При наличии только кислоты пробирки оставляют в термостате для
окончательного учета газа через 24 ч.
Подсчитывают сумму лактоэопаложительных колоний и тех из лактозоотри
цательных, которые ферментируют глюкозу с образованием кислоты и газа при
37 *С в течение 24 ч.
Результат анализа вычисляют по ГОСТ 18963 и выражают числом БГКП в
1дм3 воды (колииндекс).
4.1.3.Определение бактерий — показателей свежего фекальною загрязнения
(преимущественно Е. со И)
К бактериям — показателям свежего фекального загрязнения относят ки
шечные палочки, обладающие способностью ферментировать лактозу до кис
лоты и газа при температуре (44±0.5) "С и образовывать индол при этой
температуре.
При наличии на мембранных фильтрах темно-красных колоний с металличес
ким блеском и без него такие котонин (но не более 15) засевают в среду с
полужидкой лактозой с добавлением триптофана, предварительно нагретую до
температуры 43—44 ’С. В засеянные пробирки под пробку вставляют реактивные
полоски для обнаружения продукции индола, немедленно помещают в термостат
и инкубируют при температуре (44,0±0.5) ’С 18—20 ч. Образование кислоты и газа
8
%