ГОСТ 24849—81 С. 6
Растворы хранят в темных флаконах с притертыми пробками:
1-й —до одного месяца; 2-й —до одной недели.
Перед употреблением к трем частям 1-го раствора добавляют семь частей
2-го раствора.
3.2.7. Приготовление тетразолово-розодовой среды (ТРС) и питательных
подкладок
ИЮ см3 мясопептонного бульона, 2 г лактозы. 0,25 г сухого питательного
агара расплавляют при нагревании, стерилизуют при 112 "С 12 мин. Перед
приготовлением подкладок в среду вносят 10 см3 2 %-ного водного раствора
2-,3-,5-трифеннлтетразолий хлорида (ТГХ), 2 см3 0.01 %-ного спиртового
раствора розоловой кислоты. Средой пропитывают стерильные подкладки,
вырезанные в виде дисков размером, несколько большим диаметра мембранно го
фильтра, из асбестовых фильтров типа Зейтца (Ф) или 6—Кслоев листовой
фильтровальной бумаги.
Подкладки, запитые средой, пропитывают при осторожном нагревании до
температуры не выше 60 *С на водяной бане в течение 3 ч. Затем подкладки
высушивают при 45—50 "С в сушильном шкафу. Храпят в темноте в стерильных
упаковках. Цвет подкладок должен быть соломенно-желтым.
3.2.8. Приготовление среды КОДА
Среду нормальной концентрации готовят по способу, указанному на
этикетке, и разливают в пробирки по 9 см3. Среду удвоенной концентрации
готовят, увеличивая количество сухого препарата в два раза на тот же объем
воды, и разливают по 10, 50, 100 см3 во флаконы — в зависимости от
выбранной схемы посева.
3.2.9. Приготовление реактивных полосок для определения образования
индола
Реактивом, состоящим из 4 г ляра-диметиламинобензалццегида, 50 см3
96 %-ного этилового спирта, 50 см3 ортофосфорной кислоты (очищенной
концентрированной), смачивают полоски из фильтровальной бумаги на !/ 3 их
длины. Высушенные реактивные полоски можно сохранять в банке из
темного стекла с притертой пробкой или в плотных пакетах из черной бумаги.
Чувстви тельность полосок увеличится, если этиловый спирт заменить на
амиловый или изоамиловый.
Цвет обработанного реактивом конца бумажки должен быть желтый.
3.2.10. Приготовление индикаторных питательных полосок для определения
колинпдекса сигнальным методом (при отсутствии готовых)
Для приготовления индикаторных полосок можно использовать хроматогра
фическую бумагу массой 200 г/см3, имеющую впитываемость по Клемму около
50 и состав по волокну 100 % тряпичной полумассы. Стерилизовать бумагу
можно под бактерицидной лампой с каждой стороны по 30 мин.
Стерильную бумагу пропитывают в течение 3 ч стерильной питательной
средой (на 100 см3мясопептонного бульона Хоттингера 2 г лактозы, 0,1 г агара
и 11см3 2 %-ного водного раствора ТТХ).
Бумагу сушат в сушильном шкафу при 40—50 ’С, после чего нарезают
полоски размером, обеспечивающим впитываемость 0.5—5 см3 волы. Готовые
индикаторные полоски имеют бледно-кремовый или слегка розовый цвет.
Хранят полоски в полиэтиленовых пакетиках, защищенных от света. Стери
лизацию пакетиков проводят в 40 %-ном этиловом спирте в течение 2 суг с
последующим высушиванием.
893