ГОСТ Р 54742—2011
5
7 Проведение определения
7.1 Перед проведением определения аналитов в пробах рекомендуется предварительно прове-
сти определение рабочего стандарта, состоящего из стандартного раствора Б. Состав подвижной фазы
необходимо подобрать таким образом, чтобы значение показателя разрешения (R) составило не менее
1,5. Пики нарингина и неогесперидина в данных условиях будут достоверно отделяться от пиков бен-
зоата натрия и сорбата калия (фактор удерживания k’ для неогесперидина не будет превышать 10).
7.2 Пробу необходимо вносить в колонку в объемах 20, 10 и 5 мкл, соответственно, для колонок
диаметром 4,6, 3,0 и 2,0 мм. Длительность хроматографического определения флавоноидов в одной
пробе апельсинового сока составляет около 60 мин.
7.3 Пики мешающих веществ матрицы пробы элюируются между 25 и 60 мин при использовании
аналитической колонки длиной не более 150 мм. Для колонок длиной 250—300 мм пики мешающих ве-
ществ могут не элюироваться в течение 80—100 мин. Интервал времени инжекции для поздних пиков не
влияет на последующие определения.
7.4 Рекомендуется осуществлять температурный контроль аналитической колонки и использо-
вать автоматическую систему инжекции.
7.5 Калибровку прибора для проверки линейности измерений проводят с применением стан-
дартных растворов. Если не наблюдается линейная зависимость результатов измерений аналитов, то
необходима калибровка с применением стандартных растворов (6.2—6.4) по нескольким точ-кам
перед каждой серией определений. Если зависимость линейная, повторная инжекция раствора одного
стандартного вещества (6.2—6.4) для калибровки будет достаточной для последующей серии
определений.
8 Обработка результатов определения
Для идентификации пиков используют значение относительного времени удерживания RRT. При
этом в качестве базисного значения используют время удерживания для гесперидина. Расчет относи-
тельного времени удерживания проводят по формуле
x
RT
RRT
=
RT
x
,
(5)
ã
å
ñï
å
ðè
ä
è
í
где RRT
x
— относительное время удерживания компонента х пробы;
RT
x
— время удерживания компонента х пробы;
RT
гесперидин
— базисное значение — время удерживания гесперидина.
Количественное определение нарингина и неогесперидина проводят по площади пика. Расчет
производят с помощью программно-аппаратного комплекса хроматографической системы или по кали-
бровочным графикам.
Для линейной зависимости рассчитывают ответный фактор RF для каждого стандартного веще-
ства (формула 6), затем определяют содержание нарингина и неогесперидина в анализируемой пробе
по формуле 7
x
C
RF
=
S
x
,
(6)
x(
ñ
ò
à
íä
à
ð
ò
)
где S
x
— площадь пика компонента х;
C
x(стандарт)
— содержание компонента х в стандартном растворе, мкг/г.
x
RF
C
x(
ï
ð
î
áà
)
=
S
x(
ï
ð
î
áà
)
´
F
,
(7)
где С
х(проба)
— содержание компонента х в пробе, мкг/г;
S
x(проба)
— площадь пика компонента х пробы;
F — фактор разбавления пробы (6.6.1);
RF
x
— ответный фактор для компонента х.