ГОСТ Р 54742—2011
4 Средства измерений, вспомогательное оборудование, посуда, реактивы
и материалы
18
4.1 Хроматограф для ВЭЖХ. Хроматографическая система для ВЭЖХ, состоящая из насоса, руч-
ного или автоматического инжектора, спектрофотометрического детектора с возможностью регистра-
ции фракций в ультрафиолетовой области спектра, интегратора или программно-аппаратного комплек-
са для обработки результатов хроматографического разделения.
Для проведения определения на хроматографе ВЭЖХ используют следующие режимы:
- скорость потока 1,0 см
3
/мин;
- объем пробы 20 мкл (40 мкл в случае разбавления пробы перед определением);
- регистрация фракций спектрофотометрическим способом при длине волны 280 нм на детекторе
с разрешением не хуже 0,05 ед. оптической плотности;
- термостатируемые условия хроматографического определения для обеспечения температурно-
го интервала от 25 до 30° С.
4.2 Колонка аналитическая. Для хроматографического разделения используют аналитическую
колонку, содержащую адсорбент Сс иммобилизованным кварцевым наполнителем с высокой сте-
пенью очистки и низким уровнем металлических примесей.
Новая аналитическая колонка должна иметь следующие характеристики:
- эффективность колонки (N), рассчитываемая по формуле (1), равна для нарингина 2000:
r
t
æö
èø
2
N
=
5,545
´
ç
W
h
÷
,
(1)
где t
r
— время удерживания пика, с;
W
h
— ширина пика на половине высоты, с.
Разрешение колонки для двух пиков (R) нарингина и гесперидина составляет 1,5. Расчет значения
разрешения колонки проводят по формуле
R
=
()
2
´
(
t
r(
í
à
ðè
í
ã
è
í
)
−
t
r(
ã
å
ñï
å
ðè
ä
è
í
)
)
1,699
´
W
h(
í
à
ðè
í
ã
è
í
)
−
W
h(
ã
å
ñï
å
ðè
ä
è
í
)
.
(2)
B
Показатель симметричности пиков (S) для гесперидина принимает значения от 0,9 до 1,4. Расчет
симметричности пиков проводят по формуле
S
=
A
0,1h
,
(3)
0,1h
где A
0,1h
— ширина пика слева от перпендикуляра на 10 % высоты пика, с;
B
0,1h
— ширина пика справа от перпендикуляра на 10 % высоты пика, с.
Фактор удерживания (k’) для неогесперидина не превышает 10. Расчет фактора удерживания про-
водят по формуле
t
k
¢
=
(t
r
−
t
d
)
,(4)
d
d
где t
r
— время удерживания пика, с;
t — нулевое время (время для прохождения растворителя через колонку от узла ввода пробы до
кюветы детектора), с.
18
Для проведения хроматографического определения применяют следующие колонки (без исполь-
зования уксусной кислоты в подвижной фазе):
- колонка аналитическая
1)
С с размером частиц 5 мкм, длиной 150 мм и внутренним диаметром
4,6 мм при скорости потока 1 см
3
/мин ;
2
1)
В качестве данной колонки может быть использована колонка модельного ряда Kromasil (Higgins Analytical,
США, номер по каталогу изготовителя KS—1546—C185) или аналогичная. Указанное оборудование рекомендуется
для применения. Эта информация приведена для сведения пользователей настоящего стандарта и не означает,
что настоящий стандарт устанавливает требование об обязательном применении данного оборудования.