ГОСТ 29185-91 С. 2
3. ПОДГОТОВКА К ИСПЫТАНИЮ
3.1. Приготовление растворов и реактивов
3.1.1. Раствор сульфата железа (FeSOj) концентрацией 80 г/дм3: 8,0 гсульфата железа переносят
в мерную колбу вместимостью 100 см5, растворяют в дистиллированной воде. Раствор доводят до
метки. При использовании соли в виде кристаллогидратов проводят соответствующий пересчет на
безводную соль.
3.1.2. Раствор аммония железа (III) сульфата Fe(NH,) (S04), • 12Н.О концентрацией 50г/дм3:
5.0 г аммония железа (III) сульфата переносят в мерную каабу вместимостью 100 см’, растворяют в
дистиллированной воде. Раствор доводят до метки.
3.1.3. Раствор железа (III) аммония нитрата концентрацией 50 г/дм3: 5,0 г железа (III) аммония
нитрата переносят в мерную колбу вместимостью 100 см3, растворяют в дистиллированной воде.
Раствор доводят до метки.
3.1.4. Раствор железа треххлористого (FeCl,-6H,0) концентрацией 80 г/дм’: 8,0 г железа трех
хлористого гексагидрата переносят в каабу вместимостью 100 см3, растворяют в дистиллированной
воде. Раствордоводятдо метки.
3.1.5. Раствор сульфита натрия (натрия сернисгокислого). концентрацией 100г/дм3: 10,0 г натрия
сернистокислого переносят в мерную каабу вместимостью 100 см ’, растворяют вдистиллированной
воде. Раствор доводятдо метки.
3.1.6. Раствори, приготовленные по пп. 3.1.1—3.1.5, стерилизуюттекучим паром втечение 1ч.
3.1.7. Раствор железа (111) цитрата (C6H,0,Fe-5H.0) концентрацией 50 г/дм3: 5,0 г железа (III)
нитрата пентагидрата переносят в мерную каабу вместимостью 100см’, растворяют вдистиллирован
ной воде. Раствор доводят до метки. Раствор стерилизуют методом мембранной фильтрации по
ГОСТ 26670.
3.1.8. Растворы и реактивы для окраски по Граму готовят по ГОСТ 10444.1.
3.1.9. Растворы и реактивы для окраски бактериальных спор готовят по ГОСТ 10444.1.
3.1.10. Реактивдля определения каталазы готовят по ГОСТ 10444.1.
3.2. Приготовление питательных сред
3.2.1. Голодный агар готовят по ГОСТ 10444.1.
3.2.2. Мясную воду готовят по ГОСТ 10444.1.
3.2.3. Мясо-пептонный агар (бульон) с 0.1 % глюкозы и дрожжевым экстрактом готовят по
ГОСТ 10444.1.
3.2.4. Среду из сухого питательного агара с глюкозой готовят по ГОСТ 10444.1.
3.2.5. Железосульфитная среда: к 1дм’ дистиллированной воды добавляют 10.0 гтриптона, 0.5 г
сульфита натрия, 0.5 г железа (III) нитрата, 15,0 г агара (при приготовлении агаризованной среды)
или 1,5 г агара (при приготовлении вязкой среды). Растворяют компоненты при нагревании, после
этого смесь охлаждают до (50 ± 5) *С. Устанавливают pH среды таким образом, чтобы он составлял (7,1
± 0.1) (в пересчете на (25 ± 1) ’С). Среду разливают в пробирки по 10-12 см1 или колбы и
стерилизуют при (121 ± 1) ’С в течение 15 мин.
Тритон может быть заменен на равноценную навеску сухого панкреатического гидролизата
казеина или на десятикратный объем жидкого панкреатического гидролизата казеина, а триптон и
I дм’ воды могут быть заменены на Iдм3мясной воды, приготовленной по п. 3.2.2.
3.2.6. Трнптозо-сульфит-циклосериновый агар готовят по ГОСТ 10444.9.
3.2.7.Дифференциальная улучшенная клостридиальная среда: в 800см3 воды вносят 10.0 г пепто
на, 1,5 г дрожжевого экстракта или 7,5 см’дрожжевого экстракта, приготовленного по ГОСТ 10444.1,
5.0 гуксуснокислого натрия. Отдельно 1,0 г растворимого крахмала вносят в небольшую порцию воды it
при непрерывном помешивании переносят в кипящую воду, доводя объем до 200 см3 и получая
крахмальный клейстер. Полученный клейстер смешивают с 800 см3 смеси, содержащей остальные
компоненты, добавляют 15,0 г агара при приготовлении плотной среды или 1,5 г агара при приготов
лении вязкой среды и кипятят 30 мин. Доводят объем среды до 1дм3, добавляют 1.0 г глюкозы и
0.5 г /.-цистеина гидрохлорида, охлаждают среду до (50 ± 5) *С. Устанавливают pH таким образом,
чтобы он составлял (7,1 ± 0.1) (в пересчете на (25 ± I) *С). Среду разливают мерно в каабы и
стерилизуют при температуре (121 ± I) *С в течение 15 мин. Перед использованием к 100 см3среды
добавляют 0,4 см3 раствора сульфита натрия, приготовленного по п. 3.1.5, и 2 см’раствора железа (III)
цитрата, приготовленного по п. 3.1.7. При необходимости среду разливают в пробирки по 10- 12 см3.
99