Стр. 8 ГОСТ 25587— 83
Через 144 ч инкубации все эмбрионы охлаждают при 4°С в те
чение 16—18 ч и с экстраэмбриональнойжидкостью заражен
ных эмбрионов ставят РГА.
Из погибшихи выживших эмбрионовпринимают в расчет
только те, которые дали положительную РГА.
2.4.4. Обработка результатов
Вычисление ЛД50 для куриных эмбрионов проводят по методу
Рида и Менча.
2.5. Метод о п р е д е л е н и явирулентностив ируса
Сущность метода заключается в определении вирулентности
вируса для куриных эмбрионов.
2.5.1. Аппаратура, материалы и реактивы
Для проведения исследования применяют аппаратуру, мате
риалы и реактивы, указанные в п. 2.4.1.
2.5.2. Подготовка к исследованию
Подготовка к исследованию — по п. 2.4.2.
2.5.3. Проведение исследования
Типизация вируса проводится определением среднего времени
гибели 9—10-суточных куриных эмбрионов, вызванной минималь
ной летальной дозой.
Для проведения исследования используют разведения 10-1,
10-7, 10-®, 10-9 и 10-10.
Каждым из этих разведений инокулируют по пять эмбрионов
9—10-суточного возраста в аллантоисную полость в двух повтор
ностях с разрывом в заражении 12 ч, т. е. заражают в 8 ч утра
по пять эмбрионов каждый указанным разведением и в 20 ч эти
ми же разведениями вновь по пять эмбрионов. Зараженные эм
брионы овоскопируют ежедневно через 8 ч: в 8 ч утра и 16 ч, ре
гистрируя время гибели каждого эмбриона в течение 12 ч.
2.5.4. Обработка результатов
Минимальной летальной дозой (МЛД) считают самое большое
разведение, вызывающее гибель всех инокулированных эмбрио
нов. Среднее время гибели (СВГ) вычисляют делением суммы
часов гибеливсех эмбрионов, вызванных минимальной леталь
ной дозой, на число эмбрионов. У велогенных штаммов СВГ сос
тавляет до 60 ч, у мезогенных штаммов —от 60 до 90 ч, у ленто
генных штаммов — более 100 ч.
те
2.6. Методо п р е д е л е н и яспецифическиха н т и
л
Сущность метода заключается в обнаружении специфической
способности антител сывороткикрови больных и переболевших
птиц подавлять гемагглютинирующее действие вируса в реакции
торможения гемагглютинации (РТГА).
38