ГОСТ 25587— 83 Стр. 7
цитов) ;
сывороткис вирусомв каждую лунку добавляютпо 0,4 см3
1%-ной суспензии эритроцитов.
Для точности учета РТГА ставят контроль:
сыворотки —дляисключенияприсутствия гемагглютининов
к куриным эритроцитам (0,2 см3 сыворотки, 0,2 см3 физиологи
ческого раствора и 0,2 см3 1%-ной суспензии эритроцитов);
стандартных диагностикумов (0,2 см3 2АЕ антигена, 0,2 см3
гомологичной ему сыворотки и 0,2 см3 1%-ной суспензии эрит
ро
эритроцитов — на спонтанную агглютинацию (0,2 см3 физио
логического раствора и 0,2 см3 1%-ной суспензии эритроцитов).
Учет результатов проводят визуально через 20—30 мин после
оседания эритроцитов в контроле.
2.3.4. Обработка результатов
РТГА считают положительной, если специфическая сыворотка
к вирусу болезни Ньюкасла полностью тормозит гемагглютини-
рующую активность вируса (испытуемого штамма) не менее V*
до Vs ее гомологического титра.
2.4. Метод т и т р о в а н и я вируса
Сущность метода заключается в определении титра вируса на
эмбрионах кур.
2.4.1. Аппаратура, материалы и реактивы
Для проведения исследования применяют аппаратуру, мате
риалы и реактивы, указанные в п. 2.1.1, и дополнительно:
развивающиесяэмбрионы кур9—10-суточного возраста от
птицы, вакцинированной вакциной из группы лентогенных штам
мов не менее чем за 3 мес до сбора инкубационного яйца.
2.4.2. Подготовка к исследованию
Готовят 10-кратные разведения испытуемого вируса следую
щим образом:
в 10 стерильных пробирок наливают по 9 см3 стерильного фи
зиологического раствора. Затем в первую пробирку вносят 1 см3,
испытуемого вируса, не касаясь ее содержимого, получают разве
дение 10-1. Затем новой пипеткой после 3-кратного перемешива
ния содержимого в первой пробирке отбирают 1 см3 и переносят
во вторую пробирку, не касаясь ее содержимого. Так готовят н
последующие разведения до 1(Н включительно, используя при
этом на каждое разведение отдельную градуированную пипетку.
2.4.3. Проведение исследования
Приготовленными 10-кратными разведениями вируса иноку-
лируют по пять куриных эмбрионов по п. 2.1.3 в дозе 0,1 см3 и
инкубируют в течение 144 ч. Овоскопию проводят каждые 12 ч,
при этом эмбрионы, погибшие в первые 24 ч, не учитываются.
37