Стр. 6 ГОСТ 25587— 83
1 см3 физиологическогораствора.Антиген готовят следующим
образом: ампулы (флаконы) с антигенами разводят’ физиологи
ческим раствором (pH 7,2—7,4) до первоначального объема вы
сушенного вируса, т. е. добавляют 1 см3 физиологического раст
вора.
2.3.2. Подготовка к исследованию
Для получениярабочей дозы вируса (4АЕ)образец экстра-
эмбриональнойжидкости или антигена разводят физиологичес
ким раствором во столько раз, сколько получают от деления на 4
цифры, указывающей гемагглютинирующий титр вируса.
Например, если титр гемагглютинации 1:256, то рабочее раз-
ведение будет 256:4 = 64. Для его приготовления необходимо
взять 63 см3 физиологического раствора и 1 см3 исходного виру
са. Разведенный 1:64 вирус будет содержать 4АЕ.
Перед постановкой основного опыта проверяют правильность
выбора 4АЕ. Для этого берут пять лунок; в первую и вторую
наливают по 0,2 см3 вируссодержащего 4 АЕ, после чего во вто
рую третью, четвертуюи пятую лунки наливаютпо 0,2 см3
физиологического раствора. После пипетирования из второй лунки
переносят 0,2 см3 смеси в третью и т. д., из пятой лунки удаля ют
0,2 см3 в дезинфицирующий раствор. Таким образом, во вто рой
лунке остается 2АЕ, в третьей — 1АЕ, в четвертой —0.5АЕ, а в
пятой — 0,25АЕ.После этого в каждую лунку добавляют
по 0,2 см3 1%-ной суспензии эритроцитов, доски встряхивают и
оставляют на 30 мин при комнатной температуре.
При правильном выборе рабочей дозы (4АЕ) в первой, вто рой
и третьей лунках должна быть полная агглютинация, а в чет вертой
и пятой лунках агглютинации не должно быть.
Если в четвертой лунке оказывается частичная или полная
агглютинация, то это означает, что выбранная доза вируса со
держит не 4АЕ, а больше. В этом случае доза должна быть умень
шена. Особенно важно, чтобы в третьей лунке, где должна быть
1АЕ вируса, была полная агглютинация. Если в ней агглютина
ция не полная, то выбранная рабочая доза содержит меньше 4АЕ
и должна быть увеличена.
Для приведения рабочей дозы к 4АЕ добавляют соответствен
нофизиологический раствор или вируси повторно проверяют
величину рабочей дозы вируса.
2.3.3. Проведение исследования
Для постановки основного опыта в ряд лунок, начиная со вто
рой, наливают по 0,2 см3физиологического раствора.Затем
в первую и вторую лунки добавляют по 0,2 см3 приготовленной
специфической сыворотки. Во второй лунке пипетируют и
пере носят 0,2 см3 смеси в третью лунку и т. д. до требуемого
разведе ния. После этого во все лунки вносят по 0,2 см3 рабочего
разведе
ния вируса (4АЕ). Доски встряхивают и после 30 мин контакта
36