ГОСТ 25587— 83 Стр. 3
антибиотики (пенициллин, стрептомицин, неовитин);
парафин по ГОСТ 23683—79;
развивающиеся эмбрионы кур 9—10-суточного возраста;
эритроциты кур в физиологическомрастворе, 1%-ная взвесь;
готовят следующим образом: кровь берут у петухов или кур в
возрасте старше 6 мес из покрыльцовой вены в колбу с физиоло
гическим раствором лимоннокислого натрия.Полученную кровь
отмывают физиологическим раствором, осаждая центрифугирова
нием с частотой вращения 1500 об/мин в течение 10 мин. Из осад
ка отмытых эритроцитов готовят 1%-ную суспензию на физиоло
гическом растворе и хранят не более 5 сут при температуре 4 С.
20 мин.
2.1.2. Подготовка к исследованию
Пробы патологического материала стерильно извлекают из
глицеринового раствора, трехкратно ополаскивают стерильным
физиологическим раствором и гомогенизируют в стерильном фи
зиологическом растворе в соотношении 1:5 с помощью размель-
чителя тканей или размельчают в ступке с кварцевым стеклом,
центрифугируют с частотой вращения 1500—2000 об/мин в тече
ние
Надосадочную жидкость отсасывают пипеткой и обрабатыва
ют в течение 30 мин при комнатной температуре антибиотиками:
1000—2000 ЕД/см3 пенициллина и 500—1000 ЕД/см3 стрептоми
цина для подавления посторонней микрофлоры.
2.1.3. Проведение исследования
Надосадочную жидкость исследуют в капельной реакции ге-
магглютинации с 1%-ной суспензией эритроцитов кур.
Для исследования одной пробы материала заражают не ме нее
10 эмбрионов 9—10-суточного возраста. Контролем служат
3—5 незараженных эмбрионов.
Перед заражением эмбрионы предварительно овоскопируют,
отмечая границу пуги. Сбоку эмбриона между кровеносными со
судами отмечают участок для прокола скорлупы и инокуляции
испытуемого материала. Скорлупу со стороны пуги и место про
кола дезинфицируют и обрабатывают фламбированием. В центре
воздушного пространства и в месте введения материала делают
пробойником отверстия, затем через боковое отверстие вводят
0,2 см3 испытуемого материала на глубину 2—3 мм в аллантоис
ную полость. После заражения эмбрионов отверстия в скорлупе
заливают парафином. Зараженные и контрольные эмбрионы ин
кубируют в термостате в течение 120 ч при температуре 37°С.
В процессе инкубации эмбрионы овоскопируют два раза в сут
ки через 12 ч. Эмбрионы, погибшие в течение первых 24 ч, уни
чтожают, остальные сохраняют в холодильнике при температу
ре 4°С.
33